informe de microbiologia
(Para uso del responsable del laboratorio)
Revisar el Instructivo correspondiente para elaborar el Informe de laboratorio y/o talleres
ESTERILIZACIÓN DE MATERIAL Y PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
1. INTRODUCCIÓN
La esterilización se define como la destrucción completa de todos los microorganismos presentes incluyendo las formas vegetativas y las esporas. Para lograr ladestrucción de las bacterias, existen diferentes medios como son: la acción de los agentes químicos y físicos (Bonet,2009).Los principales métodos de esterilización empleados en el laboratorio de microbiología son: Calor húmedo donde se utiliza vapor a presión (autoclave), seco que son las técnicas de flameado e incineración, y filtración para los líquidos sin olvidar que cuando se requiere unaesterilización más completa se efectúa está usando gas (óxido de etileno) y el área de trabajo se expone a los rayos ultravioleta(Jácome,2010).
El material alimenticio en el que crecen los microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de condicionescomo son: temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno adecuado, así como un grado correcto de acidez o alcalinidad (Bonet,2009). Los microorganismos como otros seres vivos son susceptibles a los cambios de temperatura a medida que se han podido a adaptar a estos cambios (Castro y Gutiérrez,2010).
Los constituyentes habituales de los medios de cultivo son el agar, azúcares, extractos,peptonas, fluidos corporales, sistemas amortiguadores, indicadores de PH, agentes reductores, agentes selectivos (Hernández, 2011). El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparación de medios de cultivo es un polisacárido obtenido de las algas rodofíceas y proporciona un soporte al medio de cultivo ya que es una agente solidificante (Murray, 2007).
2. OBJETIVOS
Elobjetivo del presente trabajo fue aprender las técnicas de preparación de medios de cultivo así como sus diferentes clases y su forma de esterilización.
3. MATERIALES Y MÉTODOS
Preparación y Esterilización de medios de cultivo.-
Se pesó en la balanza e hidrató el medio de cultivo con la mayor exactitud posible, luego durante la disolución, se cubrió y se hizo un agujero pequeño enla boca del matraz Erlenmeyer con papel aluminio a continuación se disolvió completamente el medio evitando quemar la parte inferior del recipiente, posteriormente se colocó la tapa del frasco autoclave y finalmente se esterilizó en autoclave.
Distribución de medios de cultivo.-
Se preparó un área estéril los cuales pueden ser: mesa, alcohol, mechero o usando cámara de flujo laminar;posteriormente se marcó las placas Petri y los tubos de cultivo con los datos siguientes: Medio de cultivo, grupo de trabajo y fecha. A continuación se distribuyó suavemente el medio de cultivo, a temperatura óptima (45°C), en placas Petri se colocó de 15 a 20 ml aproximadamente y en los tubos de cultivo según su medio se colocó de 2 a 3 ml en medios líquidos, de 2 a 3 ml en medios semilíquidos, de 6 a10 ml en medios sólidos y en medios de cultivo de agar se colocó en una superficie inclinada de tal forma que el medio se solidificó a una distancia de 1-2cm de la boca del tubo. Una vez que se solidificó, se protegió de la humedad y se cubrió con folias de aluminio debidamente rotuladas, en placas Petri de vidrio se colocó una sobre otra en grupos de 4 a 6 cajas y en tubos de cultivo se cubrió yse rotuló con folia de aluminio en latas de metal. Posteriormente se almacenó en refrigeración.
Preparación y Esterilización de material.-
Para los tubos de ensayo se cubrió y colocó en una lata previamente rotulada con su debido tapón de algodón y gasa en frascos o con tapa autoclave, para pipetas se envolvió con folia de aluminio o también se usó tubos esterilizadores para pipetas. En...
Regístrate para leer el documento completo.