Informe De Perfil Lipidico

INTRODUCCIÓN

En la realización de un perfil lipídico de determina el colesterol total y sus fracciones , así como los triglicéridos en la rutina diaria del laboratorio clínico. El colesterol es un esteroides que se encuentra distribuido en casi todas las membranas celulares del organismo animal especialmente en tejido nervioso.
La mayor parte del colesterol del organismo se origina porsíntesis (≈1g/dia) y una pequeña cantidad (≈0.3g/dia) es suministrado por los alimentos de la dieta, principalmente carne, hígado, sesos yema de huevos. Se sintetiza principalmente en hígado, corteza suprarrenal, piel e intestino. En el organismo se encuentra bajo dos formas químicas: colesterol libre y colesterol esterificado e su grupo 3-OH con ácidos grasos de cadena larga.
En el plasma un 25% decolesterol total se encuentra en forma libre y un 75% en forma esterificada. El colesterol es transportado como lipoproteínas encontrándose la proporción mas alta de colesterol en las LBD ( lipoproteínas de baja densidad ) las cuales se forman a partir de LMBD ( lipoproteínas de muy baja densidad ) y una pequeña proporción en las LAD ) lipoproteínas de alta densidad) la cantidad de colesterol en losquilomicrones es mínima y representa el colesterol suministrado por la dieta. El colesterol tienes funciones muy importantes en el organismo ya que es uno de los componentes estructurales de las membranas celulares y además es precursor de hormonas esteroideas, sales biliares y vitamina d.Loa valores de colesterol normales varian en cierto grado con la edad y el sexo. en lactantes es frecuenteencontrar cifras normales de 60mg/dl como término medio, pero estos valores aumentan y en la pubertad se aproximan a los del adultos .con respecto al genero los niveles de colesterol son mas altos que en la mujer, los estrógenos tienden a disminuir el colesterol plasmático.
En el embarazo en la segunda mitad de gestación se observa un aumento del colesterol plasmático en un 30% aproximadamente porencima del valor normal. finalmente el estrés y el equilibrio hormonal afectan los niveles normales de colesterol.
Valores superiores e inferiores se observan











MATERIALES
1. Materiales:
• Agujas Nro 21
• Tubos de ensayo 13 x 100
• Algodón y alcohol
• Ligadura
• Pipetas de 1000 ul y de 10 a 100 ul
• Gradillas
• Agua destilada
• Reactivo para determinación decolesterol
• Reactivo para determinación de triglicéridos
• Reactivo para determinación de colesterol HDL


2. Equipos
• Centrifuga y espectrofotómetro


MÉTODO Y TÉCNICA
• Utilizamos el método enzimático y la técnica de la espectrofotometría.






DETERMINACIÓN DE COLESTEROL TOTAL ENZIMÁTICO.
Fundamento:
La determinación de Colesterol total esta basada en el procedimiento enzimáticodescrito por Allain, donde la colesterol esterasa (CE) hidrolizan los esteres de colesterol a colesterol libre y ácidos grasos. En presencia de oxigeno, el colesterol libre es oxidado por la colesterol oxidasa (CO) a cholest-4-en-3-one y peróxido de hidrogeno. Cuando el fenol esta oxadativamente acoplado con 4-aminoantipirina en la presencia de peroxidasa (HPO), y peróxido de hidrogeno se produceun cromóforo de quinoneimina. La intensidad del color producido es proporcional a la concentración de colesterol y se mide colorimétricamente a cerca de 500nm.
Ésteres de colesterol -----CE------- colesterol + ac. GrasosColesterol + O2 ------------CO------- Colest-4-en-3-one + H2O22H2O2 + 4-aminoantipirina + fenol ----------HPO----- quinonenica + 4H2O
La separación del HDL-colesterol, estabasada en la separación en la selectividad de los iones fosfotungstico y magnesio para precipitar todas las lipoproteínas con excepción del HDL-colesterol. Después de la centrifugación el HDL-colesterol contenido en el líquido sobrenadante, se determina con el mismo método que se determino el colesterol total.Muestra.
Las muestras mejor recomendadas son Suero recién extraído y no hemolizado....