Informe extracción





Cromatografía en filtración de gel














Representantes:
Carlos Agúndez LópezDaniel González Mancebo











PRÁCTICAS DE BIOQUÍMICA Y BIOLOGÍA MOLECULAR
CROMATOGRAFÍA DE FILTRACIÓN
EN GEL


Introducción:
La cromatografía se introdujo dentro de los métodos de separación en 1903 donde surge la primera definición a manos del botánico ruso Miguel Tswett en 1906, el cuál eligió el término cromatografía, procedente de las palabras griegas Khromatos (color) yGraphos (escrito) para describir la separación de pigmentos vegetales en distintas zonas coloreadas. Aunque la mayoría de las separaciones que se realizan actualmente son de compuestos incoloros, este término se sigue empleando.

Definición de cromatografía:
La I.U.P.A.C define actualmente la cromatografía de una forma más amplia a como lo hizo Miguel Tswett. Y la define como:”Método usadoprincipalmente para la separación de los componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dos fases, una de las cuales es estacionaria, mientras que la otra es móvil. La fase estacionaria puede ser un sólido o un líquido soportado en un sólido o en un gel (matriz). La fase estacionaria puede ser empaquetada en una columna, extendida en una capa, distribuida como unapelícula, etc”.

Aspectos históricos de la cromatografía:
Aunque en la naturaleza ocurren procesos parecidos cuando pasan disoluciones a través de arcilla, rocas, etc … la cromatografía como tal adquiere importancia cuando en 1850 el químico F.F Runqe, que trabajaba con tintas se fijó que los cationes orgánicos se separaban por migración cuando se depositaba una disolución que los contenía sobre unmaterial poroso, como el papel.

Después de Tswett, apareció Federer que consiguió separar los colorantes de la yema de huevo, y más tarde Khun, Kamer y Ruzuca, desarrollan la cromatografía en el campo de la química orgánica e inorgánica obteniendo el premio Nobel por sus trabajos.

Pero es en 1940 cuando de verdad los métodos cromatográficos adquieren importancia mundial, cuando Tiselius, dividedichos métodos en cromatografía por análisis frontal, desarrollo por elución y desarrollo por desplazamiento, obteniendo así el Nobel en el 1948.
Posteriormente la cromatografía se aplicó al campo de la bioquímica donde se conseguirían separar algunos aminoácidos acetilados.








Tipos de Cromatografía:
Las distintas técnicas cromatográficas se pueden dividir según cómo estédispuesta la fase estacionaria:

Cromatografía plana. La fase estacionaria se sitúa sobre una placa plana o sobre un papel. Las principales técnicas son:
Cromatografía en papel: se fundamenta en que las sustancia problema, puedan tener diferentes coeficientes de reparto en dos disolventes de inmisibilidad limitada, uno permanece fijo en la superficie del papel “fase estacionaria” y la fase móvilconstituida generalmente por una mezcla de disolventes parcialmente miscibles en ella.
Las sustancias a analizar, al entrar en contacto con los disolventes empiezan su fase de movilidad, produciendo unas manchas características únicas para cada sustancia, las cuales dependerán de la cantidad de compuestos que las compongan. Generalmente, estas manchas no son coloreadas de por sí y se ponen demanifiesto mediante reactivos químicos que pueden dar una reacción coloreada y que se reparten en gran estado de división.
Los contornos de las manchas así «reveladas» se señalan con lápiz y constituyen la referencia para la identificación de las sustancias aisladas. Como medida en cromatografía sobre papel se emplea el Rf (del inglés: Retention factor). Se define como el cociente de dividir el...