Informe Laboratorio Biotecnología


























































Resumen

Conocer y desarrollar las principales técnicas de aislamiento y cultivos de microrganismos es primordial para el trabajo de un biotecnólogo. Es a través deestos procedimientos donde se aplica y obtiene el producto esperado para la comunidad, donde la teoría es llevada a la práctica para posteriormente ser usada en el mercado.
Es necesario aislar el microrganismo con que requiere o desea trabajar, antes de empezar cualquier trabajo de laboratorio, que estos muy raramente se encuentran formando solo una colonia de una especie de microrganismos.
Porlo tanto de una muestra de agua de mar obtenida en terreno, se preparará un filtrado con el cual se realizará un cultivo para hongos en un medio líquido y en un medio sólido, además de un cultivo de bacterias; estos deben ser puros o axénicos para posteriormente del cultivo de hongos extraer los ácidos nucleicos y analizar la cantidad de DNA que esta presente en la muestra, luego por PCR seamplificará la región más conservada del DNA (ITS), para así verificar finalmente si el microrganismo que se ha cultivó era verdaderamente un hongo.
Que el resultado sea positivo o negativo, solo dependerá de un manejo eficaz de cada una de las técnicas empleadas y la meticulosidad con que se efectúen.
Al finalizar este práctico, el resultado no solo será el haber cultivado o no el microrganismoesperado, sino que también la adquisición del conocimiento básico para cualquier práctico de laboratorio.






















Introducción

Aprender a cultivar distintos tipos de microorganismos es esencial para el trabajo de la biotecnología, ya que estos por su pequeño tamaño y su rápida reproducción los hace ideales para la experimentación en el laboratorio.
Para quese efectué un correcto cultivo de estos microrganismos, deben prepararse en un medio adecuado para su desarrollo, ya sea un medio líquido, sólido o semisólido, el cual debe estar formado por todas las sustancias nutritivas que estos necesiten para su óptimo crecimiento, por ejemplo agar, caldos de lactosa, soluciones salinas o agua de mar (elergonomista. 2012).
Un cultivo axénico, aquel queconsiste en solo en una especie de microrganismo, es muy raro que se encuentre de formal natural en la vida cotidiana, por la misma razón aislar el microrganismo con el cual se requiere trabajar o al que se desea analizar es un paso básico, obligado e importantísimo en el procedimiento de un laboratorio.
Hay que considerar que los microrganismos marinos son muchos frágiles que los terrestres, esdecir se pierden (mueren) con mayor facilidad al cambiar sus condiciones naturales y ambientales, por lo tanto mantenerlas a un temperatura baja, impide la perdida o muerte de estos organismos en las muestras correspondientes (Danival, 2012).
Al seleccionar la muestra de hongos para al análisis y cuantificación del DNA se debe seguir el protocolo correspondiente. Homogenizar después de haberproducido un shock térmico a la muestra, esperar la precipitación de las proteínas y lípidos, para posteriormente extraer los ácidos nucleicos mediante agua PCR.
Por espectrofotometría, que es una técnica que permite determinar la concentración de una solución a través de la absorción de las radiaciones electromagnéticas de una molécula (Ruiz N. J Díaz, 2009), se calculará la cantidad de DNA presente,se obtendrá su grado de pureza a través de la razón de los ácidos nucleicos (260 nm) y de las proteínas (280nm).
Finalmente amplificando la región ITS, región más conservada de DNA de hongo, por PCR se generaran muchas copias del fragmento de DNA, así no solo se determinará el tamaño del amplificado sino que también, este mismo amplificado será la evidencia que nuestro microorganismo...