Informe microbiologia

PRACTICA # 6 – METODOS DE SIEMBRA

INTRODUCCION

Para saber que clase de microorganismos están presentes en una muestra se utilizan las siembras sobre los medios de cultivo; uno de ellos es el repique o subcultivo que es la transferencia de un cultivo bacteriano o colonia a otro medio. Se tiene como propósito de esta técnica diluir el inoculo suficientemente sobre la superficie del agar paraasí poder obtener colonias bacterianas bien asiladas a partir de unidades formadores de colonias.
Las colonias aisladas luego se pueden subcultivar individualmente pasándolas a otros medios para al fin alcanzar a obtener cultivos puros que pueden ser estudiados en medios diferenciales.
Los métodos de siembra que se realizan en los laboratorios son de gran importancia, ya que procedimiento alfinal traerá un resultado bastante claro de analizar e interpretar.

Los métodos de siembra como su nombre lo dice “métodos” indica que hay varias opciones de siembra.

Siembra por agotamiento en caja de petri: A partir del inoculo primario con un asa se disemina el material en los cuatro cuadrantes de la placa, de esta forma se disemina sucesivamente el inoculo en estrías con un movimiento dearriba hacia abajo en cada cuadrante, dando vuelta la placa en ángulos de 90º, el asa se debe esterilizar entre las sucesivas estrías. El propósito de esta técnica es diluir el inoculo suficientemente sobre la superficie del agar, con el fin de tener colonias bacterianas bien aisladas.

Siembra en tubos: Los medios se pueden distribuir en tubos, ya sea como caldo o en forma de agar.
El agarpuede ser semisólido, utilizándose para las pruebas de movilidad, o solido, generalmente formando un plano inclinado. Los tubos con caldo se pueden inocular inclinando el tubo a un ángulo de aproximadamente 30 grados y acercar un asa con el material a inocular a la superficie interior del vidrio, justo sobre el punto en el que la superficie del agar forma un ángulo agudo. Cuando el tubo de cultivo sevuelve a la posición vertical, el área de inoculación queda sumergida debajo de la superficie; es importante tener en cuenta que cuando se inoculan en este tipo de medios para pruebas de movilidad es concerniente que el asa se retire siguiendo el mismo trayecto utilizado para atravesar el medio; un mal movimiento puede dar como resultado una interpretación falsa como movilidad bacteriana.

Lostubos con agar en “pico de flauta” se inoculan primero atravesando el agar en profundidad y se continúa sembrando por estrías la parte inclinada desde abajo hacia arriba, con un movimiento en “S”, luego de retirar el asa de la parte profunda.

Existen 4 tipos de siembra en tubos:

1. Siembra por estrías: Se realiza en tubo con agar inclinado en medio solido, sobre la superficie del bisel,deslizando suavemente el asa, se siembra agotando superficie desde el fondo hasta la parte superior.

2. Siembra por picadura: Se utiliza asa recta punta, se toma la colonia con un ligero toque y se cultiva por picadura perpendicularmente sobre el medio solido o semisólido, generalmente no inclinado, El asa se introduce hasta el tercio inferior del fondo del tubo, sin toca el fondo.

3.Siembra mixta: Se realiza fundamentalmente en la diferenciación bioquímica de las bacterias, al utilizar siembras en medio como el TSI y agar citrato Simmons. Primero se siembra por punción, esterilizando el asa recta en punta cargada del microorganismo respectivo, luego se efectúa agotamiento en superficie sobre el bisel y formando estrías

4. Siembra en medio liquido: La siembra en estosmedios re realiza mediante la utilización del asa o pipeta. Cuando se utiliza el asa la cantidad a tomar puede ser el material contenido en uno o dos asadas, cuando se utiliza la pipeta, ésta estará totalmente estéril y la cantidad a sembrar de 2 ó 3 gotas ó 1 ml.

La interpretación de los cultivos primarios luego de 24 a 28 horas de incubación, requiere una considerable destreza, partiendo que...