INFORME PAPAYA TERMINADO

INFORME – LABORATORIO ENZIMOLOGIA


“EXTRACCION DE LA PAPAINA EN PAPAYA Ec.3.4.22.2.”


PRESENTADO A:
Helmer Jovany Lesmes Avila


PRESENTADO POR:
Leydi Chaves
Luis Vicente Muñoz
Sebastián Rodríguez
CODIGOS: 71971-72086-71916




UNIVERSIDAD INCCA DE COLOMBIA
FACULTAD DE INGIENERIA, ADMINISTRACION Y CIENCIAS BASICAS
PROGRAMA DE ENZIMOLOGIA
Bogotá D.C; 02 de Septiembre de 2015





OBJETIVOSExtraer papaína a partir de un tejido vegetal
Verificar la actividad catalítica de la enzima

Marco teórico
La papaya , nativa de Centroamérica en ella se encuentra la enzima papaína principalmente la cual pertenece a las proteasas que son enzimas que catalizan la hidrólisis de enlaces peptídicos en las proteínas, se agrupan según los residuos de aminoácidos, del centro activo y los mecanismos deacción, dentro de las cisteíno peptidasas (EC 3.4.22). La papaina es inhibida o inactivada por iones metálicos oxidantes y por agentes que reaccionan con los tioles (ácido ascórbico), su intensa actividad proteolítica no se modifica en zonas de pH entre 3 y 8. Es una proteína constituida por aminoácidos que se encuentran enrollados en dos partes separadas por un puente que tiene un lugar activo conun grupo tiol (SH) libre (Gallardo, 2008).
La papaína (EC 3.4.22.2) (Sankalia, 2004) es una proteasa muy bien conocida por su actividad proteolítica, se cree que es producida en carácter de defensa de la fruta contra ser consumida previamente a que sus semillas hallan madurado. Es la enzima proteolítica más potente del mercado y no tiene un substituto directo, no se ha producido ni introducidoal mercado una enzima sintética con la misma calidad. Es funcionalmente clasificada como una enzima hidrolasa y proteasa tiolica. Fue la primera enzima reconocida como miembro de una clase de enzimas proteolíticas que necesitan un grupo sulfhidrilo libre para desarrollar su actividad. La base de datos SCOP (siglas en inglés para Clasificación Estructural de Proteínas) coloca a esta enzima en laclase de las Proteasas Cisteínicas (Superfamilia: Proteasas Cisteínicas), es activada por agentes reductores y desactivada por agentes oxidantes.



Ilustración 1. Triada catalítica de la enzima papaína

Se ha conocido desde hace muchos años que la papaína puede producir una degradación de la proteína en muchos sustratos, más que cualquier otra proteasa vegetal conocida. La papaína tiene una ampliaespecificidad, así puede hidrolizar sustratos sintéticos que son los generalmente usados para tripsina, quimiotripsina o pepsina. La papaína es también muy activa en la hidrólisis de amidas y ésteres, hidrolizando las amidas de la arginina, lisina, glutamina, histidina, glicina y tirosina, todas ellas α-amino sustituidas.

Los principales tipos de papaína que actualmente se venden en el mercadointernacional son:
Papaína Cruda: Esta se obtiene por el secado del látex al sol o en hornos rústicos. Es un producto de baja calidad, baja estabilidad biológica y por lo tanto de vida corta y de una actividad proteolítica relativamente baja (aproximadamente 350 unidades tirosina/mg), su rendimiento a partir del látex fresco es de un 20% en peso aproximadamente.
Papaína Semirefinada: Es obtenida porsecado del látex bajo condiciones controladas. Sin embargo su vida es limitada a 6-8 meses, su rendimiento a partir del látex es de un 25% en peso aproximadamente y su actividad proteolítica es más bajo que de la papaína completamente refinada (450-500 unidades tirosina/mg). Su color es blanco.
Papaína Refinada: Este producto es biológicamente estable y completamente libre de materia extraña, ytiene una actividad proteolítica más alta que las anteriores (800-1000 unidades tirosina/mg y más). Generalmente es obtenida a través de un proceso de secado por aspersión al vacío (método de Bourdart); a grandes rasgos la secuencia de operaciones que sigue este látex son: Homogenización, clarificación, filtración sobre placas clarificantes, concentración, filtración esterilizante y atomización....