informe
Universidad de sucre (Sincelejo 05/09/13)
mary correa
RESUMEN
Las técnicas colorimétricas se basan en la medida de la absorción de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas. Las moléculas son capaces de absorber radiaciones electromagnéticas; tanto la longitud de onda de la radiación absorbida como la eficacia con que se absorbe depende de la estructura de lamolécula y del medio. En algunas ocasiones la muestra que deseamos determinar no posee color en sí misma; en tal caso es preciso llevar a cabo un desarrollo de color empleando reactivos. La curva de calibración se trata de una curva de referencia que se construye con cantidades conocidas de una sustancia (albumina) que se utiliza para determinar la cantidad de esta sustancia presente en una muestraincógnita. La finalidad de esta práctica fue realizar análisis cuantitativos por colorimetría, Los materiales utilizados, Fotocolorímetro, Solución de albumina, Reactivo del biuret. En la solución blanco se utilizaron 2 ml de reactivo de biuret y agua destilada. La característica obtenida se basa en la relación proporcional entre la intensidad de color y la concentración de la sustancia.La grafica obtenida demuestra el patrón estándar de la gráfica lineal y a partir de esta se pudo determinar la concentración de la sustancia desconocida.
PALABRAS CLAVE: fotocolorímetro, absorbancia, solución blanco, longitud de onda.
1. INTRODUCCIÓN.
La fotocolorimetría mucha importancia en química analítica, y pueden ser bastante específicos a la hora de determinar los componentes deuna mezcla y su proporción relativa, en la bioquímica la fotocolorimetría es usada ampliamente para ver las transformaciones que se producen en una reacción química de los reactivos a los productos, las técnicas de fotocolorimetría nos permiten realizar diversos tipos de análisis cuantitativos, bien sea la determinación de la concentración de un metal, la cuantificación simultánea de doscomponentes de una muestra, o la estimación del pKa de un indicador, estas se basan en la medida de la absorción de radiación en la zona visible por sustancias coloreadas.
La absorción de la luz está dada por la relación entre la intensidad de la luz que llega a un objeto y la forma o el tamaño de este mismo, pero al hablar de la absorción de una solución se debe tener en cuenta también la concentraciónporque puede que la sustancia que diluye se dé el caso de que absorba la luz, o el soluto, o ambos, si el que absorbe es el soluto únicamente, la intensidad que sale entonces va a depender de la concentración de la solución, esto quiere decir que a mayor concentración, menor será la intensidad de luz que va a salir y por lo tanto se dice que la absorbancia es mayor. Gracias a esto se puededeterminar la concentración de diversas soluciones mediante un fotocolorímetro, con el que al determinar la absorbancia de ciertas soluciones de concentración conocida, podemos realizar un gráfico de absorbancia en función de la concentración. Luego podremos medir la absorbancia de la sustancia problema, estando ésta diluida y coloreada para que estando coloreada absorba luz y de esta manera obtener elvalor de la concentración desconocida del gráfico. Las medidas deben realizarse con radiación monocromática, formada por una sola longitud de onda, estos equipos tienen una serie de filtros, los cuales transmiten una parte diferente del espectro, se debe tener en cuenta que cada vez que se utiliza el fotocolorímetro se debe calibrar a cero con el blanco.
2. MATERIALES Y MÉTODO.
2.1. Materiales:Espectrofotómetro.
Celdas de cuarzo.
Reactivo de biuret.
Tubos de ensayo.
Solución de albúmina.
Solucion salina.
2.2. Métodos:
a. Manejo del fotocolorímetro: antes de empezar a tomar lecturas en el instrumento, este debe calibrarse siguiendo las recomendaciones anotadas a continuación:
Se selecciona la longitud de onda.
Ajustar el cero en tramitancia.
Colocar la celda o tubo que...
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