Informe

Pre-Laboratorio Ácidos Nucleicos
Objetivos
* Reconocer un método rápido de extracción e hidrólisis de nucleoproteínas
* Identificar por medio de reacciones cualitativas los componentes delos ácidos nucleicos.

Variables
Efecto temperatura, Efecto pH y Especificidad sustrato
Introducción
Los ácidos nucleicos hacen parte de las macromoléculas por eso es tan importante su estudio. Enesta práctica básicamente vamos a realizar pruebas de tipo cualitativas para identificar los componentes de los ácidos nucleícos (Pentosa, Ribosa, Fosfatos y purinas).
Por cada 5mL de soluciónanterior añada 0.5mL de acido clorhídrico
Procedimiento
Obtención e Hidrólisis de nucleoproteínas

Colocar en baño de agua hirviente durante 30min
Triture en un mortero 5g de muestra con 13 mL deacido tricloroacetico al 10%

Centrifugar a 3000 rpm por 15 min luego transferir el sobrenadante a un tubo marcado como hidrolizado

Centrifugue a 3000 rpm durante 15 min

Descartar el sobrenadantey resuspenda el precipitado con 10mL de agua destilada solución de nucleoproteínas

Reconocimiento de pentosas
Agregar 1mL de hidrolizado en un tubo de ensayo
Agregar 4 gotas de cisteína al 5%Añadir lentamente 5mL de H2SO4 al 70%
Mezclar lenta y cuidadosamente, dejar reposar y observar cambio de color a rosado como prueba positiva
Repetir el ensayo sustituyendo el hidrolizado pordesoxirribosa al 0.02%




Identificación de la Ribosa
Marcar dos Tubos (1,2)
En el tubo 1 coloque 1mL de hidrolizado
En el 2 mL de ribosa al 0.2%
Añadir 1mL de orcinol mezclar y colocar en baño deagua hirviendo hasta la aparición de color verde

Reconocimiento de fosfatos
En un tubo de ensayo mezcle 1mL de hidrolizado con 0.5mL de molibdato de amonio
En un tubo de ensayo mezcle 1mL dehidrolizado con 0.5mL de molibdato de amonio
La aparición de un color amarillo comprueba la presencia de fosfatos

Identificación de purinas
Agregue en un tubo de ensayo 0.5 ml de hidrolizado, 1mL...