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CONCENTRACION DE MICROORGANISMOS.
I. OBJETIVOS
Determinar el número total de microorganismos por el método de la celda Sedwigth – Rafter y el método de la franja.
Determinar la concentración de microorganismos por el método de la celda Sedwigth – Rafter y el método de la franja.
Determinar el número de campos de la celda Sedwigth – Rafter y el método de la franja.

II. FUNDAMENTO TEORICODEFINICIÓN DE ALGAS
Las algas difieren de los otros grupos de seres pequeños o microscópicos por poseer sus pigmento internos llenos de clorofila, que a veces están ocultos parcialmente o enmascarados por otros pigmentos, lo que las capacita en presencia de la luz, combinar agua con anhídrido carbónico para formar almidón o sustancias análogas y liberar oxígeno.
Las algas tienen la capacidad demodificar el pH, la alcalinidad, el color y la turbiedad.
MÉTODOS
CUALITATIVO
Nos proporciona información sobre las especies planctónicas presentes a través de la diversidad y abundancia relativa.
CUANTITATIVO
Nos proporciona información sobre la densidad total de plancton a través del número de microorganismos presentes por unidad de volumen de agua.
Examen para determinar la concentración de organismosen un ambiente, aplicado especialmente a recuento de algas y protozoos. Puede realizarse sobre muestra directa, concentrada o diluida.
Para expresar resultados se usan diferentes unidades. Las más comunes son:
a) Nº organismos por mL o por L
b) Unidad estándar de área (UEA) por mL
Elementos necesarios: microscopio con objetivos calibrados; ocular de Whipple, u otro ocular reticulado, cámara deSedgwick-Rafter, de Nebauer, otras.
a) Determinación del Nº de Organismos por mL
Procedimiento: Introducir la muestra, previamente homogeneizada en la cámara de recuento y cubrir con la lámina cubreobjeto, evitando la presencia de burbujas de aire. Dejar reposar unos minutos. Colocar la cámara sobre la platina del microscopio. Verificar la presencia del reticulado en el ocular. Escoger el objetivoadecuado (generalmente 10x o 20x), enfocar y proceder a contar el número de organismos por campo.
Se entiende por campo el área ocupada por el cuadrado del reticulado (Whipple u otro) Dependiendo de la densidad de los organismos en la muestra, se cuenta como mínimo 10 campos al azar.
b) Determinación de las Unidades Estándar de Área por mL
Una de las formas para estimar la densidad de algas en elagua es la determinación de una unidad convencional conocida como "Unidad Estándar de Área", que incluye la superficie ocupada por los microorganismos en el campo del microscopio. Dicha área equivale a la ocupada por un cuadrado de 20 x 20 micrones por lado, o sea 400 micrones cuadrados.
1 UEA = 400
Procedimiento: Introducir 1 ml de muestra previamente homogeneizada en una cámara de SedgwickRafter, cubrir con la lámina cubreobjeto, evitando dejar atrapadas burbujas de aire.
Dejar reposar unos minutos, y colocar en la platina del microscopio.
Verificar que el objetivo del microscopio cuente con el reticulado de Whipple. Escoger el objetivo adecuado (generalmente 10x o 20x), enfocar y proceder a contar como unidades los cuadrados (1x100 del reticulado de Whipple) ocupados totalmente por lasalgas y como fracción de unidad, los cuadrados parcialmente llenos.


III. RESULTADOS
Método de la Celda.- La muestra usada fue del estaque de Arquitectura
16 de abril de 2008; 10:00 a.m.
N°de
Campos
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
N° de
M.o.
26
46
41
29
35
26
19
9
7
8
4
6
9
11
7
7

Numero de campos: 16
Suma total de microorganismos = 290
Numero de campos a lo ancho de celda: 16
Numero decampos a lo largo de celda: 16×50/20=40
Números de campos en toda la celda: 15×40=640
Concentración de m.o. /mL =563×54 =30402 m.o. / mL





Método de la Franja.- La muestra usada fue del estanque de arquitectura, el portaobjeto usado en la práctica fue de 22x22 mm.
16 de abril de 2008; 10:00 a.m.
165 gotas - 10mL
1 gota – Vgota Vgota= 0.0606 mL
N°de
Campos
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14...