Informe3
Páginas: 18 (4356 palabras)
Publicado: 30 de noviembre de 2015
Electroforesis de proteínas
[17/11/2015]
Informe
Introducción
Muchas veces en el laboratorio, necesitamos separar distintas macromoléculas (“moléculas grandes”) por distintos parámetros, ya sea por peso, forma, carga, etc. Para hacer esto disponemos de un montón de técnicas o procedimientos que aseguran un buen resultado. En el siguiente informe se analizará lacromatografía de afinidad y la electroforesis como una técnica de separación de proteínas, esto no quiere decir que estas técnicas no sean capaz de separar otras macromoléculas.
¿Qué son las proteínas?
Las proteínas son macromoléculas de variadas funciones fundamentales para la vida. Representan más de un 50% de la masa seca de la célula e intervienen en prácticamente todas las funciones querealizan los seres vivos; algunas aceleran reacciones, otras le dan estructura a la célula, otras ayudan a transportar componentes importantes para nuestro cuerpo, y así un montón de otras funciones importantes.
Metiéndonos en su estructura, las mismas están compuestas por aminoácidos ligados por enlaces peptídicos, un grupo carboxilo unido a un grupo amina. Esta cadena de aminoácidos tiene una formaparticular dada las interacciones entre los mismos, y con el medio, lo que le da una función particular [1].
Es importante entender lo que es una proteína para poder predecir su comportamiento al momento de utilizar una técnica de separación de proteínas como la que se utilizará en el presente informe. Además de entender lo que es una proteína recombinante lo cual será útil para entender laexperimentación. Dicho de forma breve las proteínas recombinantes son proteínas de una especie expresadas en otra especie distinta. Para hacer esto es necesario contar con técnicas para la inserción de una sección de ADN (ADN recombinante) que codifica dicha proteína, en cierta especie huésped.
Para seguir con el marco teórico se introducirá en las cromatografías, una de las técnicas deseparación a utilizar en el informe.
¿Qué son las cromatografías?
De forma general se puede definirse como una técnica que separa una mezcla de solutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se establece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o gaseosa) a través de un lecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser líquida o sólida. Laspropiedades de los componentes de una mezcla determinan su movilidad entre sí y con respecto a la fase móvil. La base de la separación cromatográfica será, por tanto, la diferencia en la migración de los mismos.
Hay muchos tipos de cromatografías, la de nuestro interés, ya que se utilizará en el informe, es la cromatografía de afinidad.
¿Qué son las cromatografías de afinidad?
LaCromatografía de Afinidad permite la separación de mezclas de compuestos por su afinidad o capacidad de unión a un determinado ligando. En este caso, compuestos que se retienen en la columna son aquellas que se unen específicamente a un ligando que previamente se ha unido covalentemente a la matriz de la columna. Después de que el compuesto que no se unen al ligando son lavados o eluidos a través de lacolumna, el compuesto de interés que ha quedado retenido en la columna se eluye o libera mediante el empleo de una solución que contiene bien, ligando libre u otro compuesto que rompa la interacción entre el ligando y el compuesto de interés [2].
*En este informe se hizo una cromatografía de afinidad por metales, lo que indica que el ligando está compuesto por un ion metálico. Los eluidos de estaetapa serán analizados por una electroforesis.
¿Qué es la electroforesis?
La electroforesis como ya se había mencionado es una técnica de separación. En particular esta técnica que explota dos propiedades de las moléculas para poder separarlas, carga y tamaño.
La electroforesis de proteínas básicamente se basa en la migración diferencial de proteínas cargadas en un campo eléctrico....
Electroforesis de proteínas
[17/11/2015]
Informe
Introducción
Muchas veces en el laboratorio, necesitamos separar distintas macromoléculas (“moléculas grandes”) por distintos parámetros, ya sea por peso, forma, carga, etc. Para hacer esto disponemos de un montón de técnicas o procedimientos que aseguran un buen resultado. En el siguiente informe se analizará lacromatografía de afinidad y la electroforesis como una técnica de separación de proteínas, esto no quiere decir que estas técnicas no sean capaz de separar otras macromoléculas.
¿Qué son las proteínas?
Las proteínas son macromoléculas de variadas funciones fundamentales para la vida. Representan más de un 50% de la masa seca de la célula e intervienen en prácticamente todas las funciones querealizan los seres vivos; algunas aceleran reacciones, otras le dan estructura a la célula, otras ayudan a transportar componentes importantes para nuestro cuerpo, y así un montón de otras funciones importantes.
Metiéndonos en su estructura, las mismas están compuestas por aminoácidos ligados por enlaces peptídicos, un grupo carboxilo unido a un grupo amina. Esta cadena de aminoácidos tiene una formaparticular dada las interacciones entre los mismos, y con el medio, lo que le da una función particular [1].
Es importante entender lo que es una proteína para poder predecir su comportamiento al momento de utilizar una técnica de separación de proteínas como la que se utilizará en el presente informe. Además de entender lo que es una proteína recombinante lo cual será útil para entender laexperimentación. Dicho de forma breve las proteínas recombinantes son proteínas de una especie expresadas en otra especie distinta. Para hacer esto es necesario contar con técnicas para la inserción de una sección de ADN (ADN recombinante) que codifica dicha proteína, en cierta especie huésped.
Para seguir con el marco teórico se introducirá en las cromatografías, una de las técnicas deseparación a utilizar en el informe.
¿Qué son las cromatografías?
De forma general se puede definirse como una técnica que separa una mezcla de solutos basada en la velocidad de desplazamiento diferencial de los mismos que se establece al ser arrastrados por una fase móvil (líquida o gaseosa) a través de un lecho cromatográfico que contiene la fase estacionaria, la cual puede ser líquida o sólida. Laspropiedades de los componentes de una mezcla determinan su movilidad entre sí y con respecto a la fase móvil. La base de la separación cromatográfica será, por tanto, la diferencia en la migración de los mismos.
Hay muchos tipos de cromatografías, la de nuestro interés, ya que se utilizará en el informe, es la cromatografía de afinidad.
¿Qué son las cromatografías de afinidad?
LaCromatografía de Afinidad permite la separación de mezclas de compuestos por su afinidad o capacidad de unión a un determinado ligando. En este caso, compuestos que se retienen en la columna son aquellas que se unen específicamente a un ligando que previamente se ha unido covalentemente a la matriz de la columna. Después de que el compuesto que no se unen al ligando son lavados o eluidos a través de lacolumna, el compuesto de interés que ha quedado retenido en la columna se eluye o libera mediante el empleo de una solución que contiene bien, ligando libre u otro compuesto que rompa la interacción entre el ligando y el compuesto de interés [2].
*En este informe se hizo una cromatografía de afinidad por metales, lo que indica que el ligando está compuesto por un ion metálico. Los eluidos de estaetapa serán analizados por una electroforesis.
¿Qué es la electroforesis?
La electroforesis como ya se había mencionado es una técnica de separación. En particular esta técnica que explota dos propiedades de las moléculas para poder separarlas, carga y tamaño.
La electroforesis de proteínas básicamente se basa en la migración diferencial de proteínas cargadas en un campo eléctrico....
Leer documento completo
Regístrate para leer el documento completo.