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Bases moleculares de la Hemofilia B
La hemofilia B, caracterizada por una deficiente actividad del FIX, es unas 5-6 veces menos frecuente que la hemofilia A y se estima que afecta a unas 15-20 personas por millón. Un 80% de los niños afectos son graves, un 5% moderados y un 15% leves (Sadler y Davie, 1994). Al igual que el FVIII, el FIX participa en la fase intermedia de la vía intrínseca decoagulación. Es sintetizado en el hígado y circula inactivo en plasma a una concentración media de 2-5 ug/ml en forma de una única cadena polipeptídica de 415 aminoácidos y unos 56 KDa, de los cuales el 20% corresponden a carbohidratos. Su vida media es de unas 24 horas aproximadamente (Nilsson, 1994).
El FIX es una serin-proteasa que se activa tras sufrir una proteolisis específica por el FXIa opor el complejo FVIIa-FT. Una vez activado, el FIXa puede formar el complejo de activación del FX uniéndose al FVIIIa, fosfolípidos de superficie y Ca2. La existencia en las células endoteliales de receptores con alta afinidad para el FIX asegura una eficiente y localizada activación del FX por el complejo FIXa-FVIIIa, que actúa como una unidad. Resulta por tanto lógico que las hemofilias A y Bpresenten una gran similitud clínica, dado que son el resultado de alteraciones moleculares que afectan la función de dos componentes diferentes que forman parte de un mismo complejo.
 
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Figura 1: Localización y organización genómica del gen FIX. |
 
 El gen FIX
El gen FIX se encuentra localizado en la región telomérica del brazo largo del cromosoma X, en la banda Xq27 (Chance y col., 1983).En la misma región, en posición distal, se encuentran los loci correspondientes a los genes FMR-1 (su alteración provoca el desarrollo del Síndrome del cromosoma X frágil) y FVIII (Purrello y col., 1985). Tal y como se indica en la Figura 1 el gen FIX, clonado en 1982, tiene un tamaño cercano a las 34 Kb y consta de 8 exones y 7 intrones (Anson y col., 1984; Choo y col., 1982; Kurachi y Davie,1982; Yoshitake y col., 1985). El tamaño de los exones varía entre los 25 nucleótidos del exón 3 y los 1935 nucleótidos del exón 8. Los intrones también presentan una gran heterogeneidad en su longitud, siendo de tan solo 188 nucleótidos en el intrón 2 y de 9473 nucleótidos en el intrón 6. El gen contiene 4 secuencias Alu, de las cuales una se encuentra en el intrón 1 y las 3 restantes en el intrón6. Inmediatamente después del gen FIX se sitúa una quinta secuencia Alu, en posición 3’ flanqueante.
En la región promotora del gen FIX se encuentran diversas secuencias de unión a elementos trans tales como el HNF-4 (Hepatic Nuclear Factor 4), el C/EBP (CCAAT/Enhancer Binding Protein), el DBP (D-site Binding Protein) y el NF-1L (Nuclear Factor 1-Liver) (High y Roberts, 1995). Sin embargo elpromotor carece de la secuencia TATA consenso, habiéndose además identificado diversos inicios de transcripción (Reijnen y col., 1990). A pesar de que existe cierta controversia, el inicio más frecuente parece ser el que se encuentra a 29 nucleótidos del primer codón ATG (Lillicrap, 1998).
Los ocho exones dan lugar a un total de 7 dominios funcionales y, prácticamente, cada exón codifica un dominio.Así, el exón 1 corresponde al péptido señal, el exón 2 al propéptido y a la región Gla, el exón 3 codifica para una región rica en aminoácidos aromáticos que hace de puente entre los dominios adyacentes, el exón 4 da lugar a la región EGF-1, el exón 5 a la región EGF-2, el exón 6 codifica para el péptido de activación y finalmente los exones 7 y 8 corresponden al dominio proteasa o catalítico(Roberts, 1993).
Existen tres inicios potenciales de traducción localizados en las posiciones –46, -41 y –39 relativas al comienzo de la proteína madura, por lo que la longitud exacta del péptido señal es aún desconocida. Éste es el encargado de guiar al FIX inmaduro a través del retículo endoplasmático, donde es procesado por una peptidasa entre los residuos Cys-19 y Thr-18, eliminando el péptido...