INFROME DE PR CTICAS Cromatograf A
INTEGRANTES:
López Montalvo Diego
Millones Rojas Mario Manuel
Orihuela Talledo Angie Alexandra
Pacotaype Huamanyauri Ricardo Junior
Objetivos:
Separar una mezcla de sustancias mediante la cromatografía en columna.
Determinar la relación de frente, de una mezcla de azul de metileno – anaranjado de metilo.
Analizar la diferente velocidad con que se desplazan los componentes deuna muestra.
Determinar la importancia de la polaridad en los sistemas cromatográficos.
Procedimiento:
Cromatografía en columna: esta técnica se aplicó para la separación de azul de metileno-anaranjado de metilo.
1) Preparación de la columna: Introducir un trozo de algodón hasta el fondo de la columna. El solvente utilizado, en este caso, fue una mezcla alcohólica. Abrir la llave de la columnahasta que la altura del solvente sea de 1mm por encima de la superficie del adsorbente.
2) Siembra: adicionar 1 ó 2 cc de la mezcla a separar, abrir la llave hasta que todo el colorante sea adsorbido por la fase fija.
3) Elución:Ir adicionando más solvente hasta que se eluya el colorante que se desplaza más rápidamente. Cambiar de recipiente y eluir el segundo colorante.
Cromatografía en capa finay papel:
1) Dibujar una línea muy fina a 1cm (en la capa)ó 1.5 cm( en la tira de papel) de distancia del borde inferior. Luego, dividir la placa por la mitad e indicar dos puntos equidistantes de los bordes y entre sí.
2) Con la ayuda de un capilar, colocar el azul de metileno y anaranjado de metilo (por separado) en cada uno de los puntos equidistantes. En el centro colocar una gota de lamezcla de azul de metilo-anaranjado de metileno. Dejar secar por unos minutos.
3) A continuación, introducir la capa /papel en un recipiente/tubo de ensayo, que contenga la mezcla de propanol, acetona y agua.
4) Cuando el solvente esté por llegar al borde superior, retirar la capa/papel del recipiente/tubo de ensayo, marcar el frente, dejar secar y calcular el Rf.
Cálculos y resultados
Cromatografíaen capa fina
Rf A= RfA = = 0.953
RfB= RfB = = 0.046
El anaranjado de metilo se desplaza con mayor velocidad que el azul de metileno.
Cromatografía en papel
Rf A= RfA = = 0.676
RfB= RfB = = 0.197
El anaranjado de metilo se desplaza con mayor velocidad a lo largo de la tira de papel, en comparación con el azul de metileno.
Conclusiones:
En ambas experiencias, tanto en cromatografía encapa fina, como en la tira de papel, se constata que el azul de metileno es más polar con la fase estacionaria que el anaranjado de metilo, ya que está firmemente adsorbido con el centro activo de la fase fija. En cambio, el anaranjado de metilo se eluye con mayor facilidad.
El método de capa fina y papel se utiliza mayormente para realizar análisis de mezclas de sustancias; también se puedenseparar mezclas de sustancias pero en cantidades muy pequeñas.
Bibliografía:
Cueva, P.; León, J. &Fukusaki, A. (2013). Manual de Laboratorio de Química Orgánica. (3ra ed.). Lima: UNALM-Ediagraria.
Cuestionario
1. ¿Cuál es la principal utilidad de la cromatografía en columna?
La cromatografía en columna, principalmente se usa para la separación y purificación de sustancias o mezclas de las mismas.También se pueden analizar las muestras purificadas.
2. ¿Qué fenómenos físicos intervienen en una columna cromatográfica que utilice silicagel como fase fija?
Los fenómenos físicos son la adsorción y desorción. Ambos se basan en la superficie de contacto que pueda tener con la muestra problema. En el primero, las moléculas de la sustancia o mezcla de sustancias se adhieren a la superficie deladsorbente. En la desorción ocurre lo contrario. Además, es importante recalcar el papel de la polaridad entre muestra problema y adsorbente/ eluyente; ya que de eso dependerá la velocidad con que esta se desplacen sus componentes.
3. ¿Cuáles son las principales diferencias entre un HPCL y una columna cromatográfica simple?
Ambos se basan en los mismos principios, pero la HPCL es un método mucho más...
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