Ingenieria

MÉTODOS DE ESTUDIO DE LOS VIRUS

Objeto de Estudio 3

ACTIVIDADES DE DESARROLLO

1. Los virus pueden cultivarse y replicarse de tres maneras diferentes:

Inoculación en animales de experimentación. Así se hacía en el comienzo de la virología. En la actualidad se usa poco. La inoculación en animales de experimentaciónde muestras clínicas o de virus para su aislamiento opropagación, es una técnica poco empleada debido a diversisas dificultades como el mantenimiento de los animales,, la laboriosidad de la inoculacióny el peligro de difusión del virus con las excretas de los animales. Se emplea únicamente cuando se trata de propagar virus cuya replicación en los otros sistemas –embriones o cultivos celulares– no es posible. Los animales más utilizados: monos, los cobayos ylos ratones lactantes.
Desarrollo en huevos embrionados. En huevos fecundados después de 6-8 días a partir de la puesta. También pueden ser de otras aves. Los virus se inyectan en el interior del huevo con una jeringa y dependiendo del tipo de virus se deben inyectar en una región determinada. Los más utilizados son los embriones de pollo, los huevos fecundados se incuban hasta el momento de suinoculación que suele oscilar entre 6 y 14 días. Las inoculaciones, que pueden realizarse en diversas zonas del embrión (cavidad amniótica, saco vitelino o cavidad alantoidea)Se requiere de experiencia para su realización, debido al tipo de inoculación y extracción. La inoculación en la cavidad amniótica es las más utilizada para el aislamiento de virus a partir de muestras clínicas

Cultivoscelulares. Para cultivar virus se utilizan tipos específicos de células de cultivo tisular. Los cultivos de células primarias se obtienen por tratamiento de algún órgano animal específico con tripsina o colagenasa. Las células obtenidas con este método se cultivan en monocapa (fibroblastos o células epiteliales) o en suspensión (linfocitos) en medios artificiales complementados con suero bovino u otrafuente de factores de crecimiento. Las células primarias se pueden separar con tripsina, se diluyen y crecen en nuevas monocapas (subcultivos) para convertirse en cultivos celulares secundarios. Las líneas de células diploides son cultivos de un único tipo de célula con los que se puede hacer un gran número de pases, aunque finito, antes de presentar signos de senescencia o experimentar cambiossignificativos en sus características. Las líneas celulares tumorales y las líneas celulares inmortalizadas, iniciadas a partir de tumores de pacientes o por efecto de virus o compuestos químicos respectivamente, se componen de células de un solo tipo que pueden ser sometidas a pases continuos sin envejecer.
Las células primarias de riñón de mono son muy adecuadas para llevar a cabo el aislamientodel virus de la gripe. paramixovirus, muchos enterovirus y algunos adenovirus. Las células diploides fetales humanas, que generalmente son fibroblastos, permiten el crecimiento de un amplio abanico de virus (p. ej., VHS, VVZ, CMV, adenovirus, picornavirus). Las células HEp-2, una línea continua de células epiteliales derivada de un cáncer humano, son excelentes para aislar el virus respiratoriosincitial, los adenovirus y los VHS. Muchos virus con importancia clínica se pueden aislar, al menos, con alguno de estos cultivos celulares.

2. ¿Por qué es importante el aislamiento de un virus en cultivo celular?

Porque debido a la atribución de estas células cultivadas, se descubrieron virus como el adenovirus, rinovirus, coronavirus, entre otros, así como el estudio de los virus másdetalladamente. También juega un papel importante en la revolución en el diagnostico de las enfermedades virales, desarrollo de vacunas y en los avances recientes en la biología molecular de los virus de los vertebrados

3. ¿Qué es concentración y purificación viral?

Una vez que el virus ha sido adecuadamente necesita ser recuperado de las células hospederas y luego ser purificado. Esto...