Ingeniero Agronomo

agronomía mesoamericana 20(2):311-317. 2009
ISSN: 1021-7444

identificación mediante pcr del sexo de la papaya (Carica
papaya L.), híbrido “Pococí”1
Ericka Saalau-Rojas2, Walter Barrantes-Santamaría3, Carlos Luis Loría-Quirós3, Arturo Brenes-Angulo2,
Luis Gómez-Alpízar2

RESUMEN

ABSTRACT

Identificación mediante PCR del sexo de la papaya
(Carica papaya L.), híbrido “Pococí”. Elobjetivo de la presente investigación fue identificar plantas hermafroditas del
híbrido de papaya “Pococí”. Para la identificación del sexo
de las plantas del híbrido “Pococí”, se utilizó el protocolo
descrito por Deputy et al. (2002), con algunas modificaciones. Esta metodología emplea un PCR múltiple que permite
la amplificación simultánea de dos fragmentos (1.300 y 800
pb respectivamente) paraplantas hermafroditas y de un solo
fragmento (1.300 pb) para plantas femeninas. El ADN se
extrajo a partir de hojas de plantas de invernadero o campo
con dos metodologías de extracción, CTAB y lisis alcalina
(NaOH). La amplificación por PCR del ADN extraído de
muestras foliares de papaya híbrido “Pococí”, con ambos
métodos de extracción, produjo los fragmentos del tamaño
esperado. Ladeterminación del sexo de 1.500 plántulas en
almácigo mostró un 46 % de plántulas hermafroditas y un 54
% de plantas femeninas. La proporción observada de plantas
femeninas: hemafroditas no varió de la esperada (1:1) según
la prueba de chi-cuadrado (p= 0,4237). Las plantas hermafroditas fueron llevadas al campo y al momento de la floración
se determinó su sexo. La correspondencia entre el sexadopor
PCR y la expresión sexual en campo fue de un 98 %.

Sex determination of papaya (Carica papaya L.)
“Pococí” hybrid by PCR. The objective of this work
was to identify papaya hermaphrodite plants of the hybrid
“Pococí” at the seedling stage using the Polymerase Chain
Reaction (PCR). Sex identification was achieved according
to the methodology described by Deputy et al. (2002) with
somemodifications. This methodology employs a multiplexPCR assay that allows simultaneous amplification of two
fragments (800 bp and 1300 respectively) for hermaphrodite
plants and one fragment (1300 bp) for female plants.
Genomic DNA was extracted from leaves and two extraction
protocols were evaluated, CTAB and rapid alkaline lysis
(NaOH). The amplification reaction yielded the expected
size ofthe fragments with both methods of DNA extraction.
PCR sex determination of 1500 seedlings yielded 46 %
of hermaphrodite and 54 % of female plants. The female:
hermaphrodite plant ratio observed did not vary from the
expected (1:1) ratio according to the chi-square test (p =
0.4237). Hermaphrodite plants were planted in the field
in San Carlos region, Costa Rica, and sex was determined
atflowering. The correspondence between the PCR sexed
plants and sexual expression in the field was 98 %.

Palabras clave: Plantas hembra, hermafroditas, marcadores moleculares, extracción de ADN, genes ligados al sexo.

Key words: Female plants, hermaphrodites, molecular
markers, DNA extraction, sex-linked genes, sex expression.

Re­ci­bi­do: 16 de marzo, 2009. Acep­ta­do: 16 de noviembre,2009. Proyecto de investigación “Innovación tecnológica en almacigos de papaya”
de la Universidad de Costa Rica.
2
Laboratorio de Biotecnología de Plantas, Centro de Investigaciones Agronómicas, Universidad de Costa Rica. San José, Costa Rica.
esaalau@gmail.com, arturo.brenes@ucr.ac.cr, luis.gomezalpizar@ucr.ac.cr
3
Estación Experimental Agrícola Fabio Baudrit Moreno, Universidad deCosta Rica. Alajuela, Costa Rica. walter.barrantes@ucr.ac.cr,
clloria@gmail.com.
1

312

Saalau et al.: Identificación con PCR del sexo en papaya

Introducción
La papaya presenta tres tipos de plantas de acuerdo al sexo de las flores que produce: hembras, machos
y hermafroditas. Diferentes hipótesis han sido planteadas para explicar la genética de la determinación
del sexo en papaya,...