Ingeniero

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA
ESCUELA DE POST GRADO
Maestría en Tecnología de Alimentos

ANÁLISIS DE ALIMENTOS POR INSTRUMENTACIÓN
TEMA :
Espectrofotometría I
PROFESOR :
Mg. Sc. Briceño Berrú, Luis Antonio
ALUMNOS :
HUAMAN ZANABRIA, Ebel Angel
MAMANI FERNÁNDEZ, Yanina Teresa
VERGARA COPACONDORI, Karín Lee
VIDAURRE RUIZ, Julio Mauricio

La Molina, 25 deAbril del 2012

ESPECTROFOTOMETRIA I

DETERMINACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA DE MAXIMA ABSORCIÓN Y DEL RANGO DE CONCENTRACIONES APROPIADO PARA QUE SE CUMPLA LA LEY DE BEER

I. INTRODUCCIÓN :

El espectrofotómetro es un instrumento esencial para los biólogos, químicos y alimentarios en el análisis de muestras químicas, biológicas y de alimentos, pues familiarizarse con los protocolos deoperación y la comprensión de lo que significan sus resultados son muy importantes en el desarrollo de la técnica de laboratorio para los estudiantes de Maestría en tecnología de alimentos. Este experimento ayudará a los estudiantes a adquirir experiencia de laboratorio en el uso del espectrofotómetro.
Este instrumento detecta compuestos de absorción de la luz en longitudes de onda seleccionadas yproduce un número correspondiente a su absorción (Alberts et al, 2004). Cada compuesto absorbe y dispersa la luz de este más que otros en determinadas longitudes de onda. Los años de investigación han proporcionado información sobre una serie de compuestos, que permiten utilizar la espectrofotometría como una forma de identificar y determinar la concentración de una sustancia. En concreto, elespectrofotómetro mide cuantitativamente la cantidad de luz que pasa a través de un compuesto en solución como una fracción de la luz emitida por la máquina ("Espectrofotómetro"). Un monocromador se utiliza para producir luz en intervalos muy pequeños de longitud de onda. Un fotodetector detecta la cantidad de luz emitida por la máquina y la cantidad que se transmite a través de la solución. Unalongitud de onda es especificada, y una pantalla indica el porcentaje de transmitancia.
En esta práctica se realizan dos experimentos. En primer lugar, se determinará la longitud de onda de máxima absorción, es decir, a la que un compuesto (en este caso, azul de metileno) absorbe mejor la luz. En segundo lugar, utilizando esta longitud de onda, a diferentes concentraciones, se determinará, la máximaconcentración medida, es decir hasta qué punto se cumple la ley de beer, mediante un análisis estadístico de los datos.

II. OBJETIVOS:

* Determinar la longitud de onda adecuada (Longitud de onda de máxima absorción), para la solución de azul de metileno.

* Determinar los niveles de concentración adecuados para el análisis cuantitativo por espectrofotometría del azul de metileno.* Determinar del coeficiente de extinción molar para la solución de azul de metileno.

III. REVISIÓN DE LITERATURA:

3.1) Espectrofotometria

Según Fennema, (1996), la espectrofotometría es el método de análisis óptico más usado en las investigaciones biológicas, químicas, farmacéuticas, etc. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida otransmitida por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia.

Principio de la Espectrofotometría

Skoog, et al. (1992), manifiesta, que todas las sustancias pueden absorber energía radiante, aun el vidrio que parece ser completamente transparente absorbe longitud de ondas que pertenecen al espectro visible; el aguaabsorbe fuertemente en la región del infrarrojo.

La absorción de las radiaciones ultravioleta, visibles e infrarrojas depende de la estructura de las moléculas, y es característica para cada sustancia química. Cuando la luz atraviesa una sustancia, parte de la energía es absorbida; la energía radiante no puede producir ningún efecto sin ser absorbida.El color de las sustancias se debe a que éstas...