ingeniero

RESUMEN
En el presente artículo se hace una breve descripción de los marcadores
moleculares y de las categorías y técnicas basadas en hibridación y en la
reacción en cadena de la polimerasa PCR. A continuación se hace una
esplicación detallada del método de extracción de ADN empleado en el laboratorio
de Biología Molecular de la Universidad Nacional de Colombia, sede
Palmira, para losestudios de diversidad genética, enfatizando en las reacciones
que ocurren a lo largo del proceso de extracción.
ABSTRACT
In the present article a brief description of molecular markers, the categories
and techniques based on hybridizing and the chain reaction of polymerase
PCR is done. Next it is explained thorough of the ADN extraction method for
the genetic diversity studies employed in themolecular biological laboratory
of the National University, headquarters Palmira, emphasizing in the reactions
that occurs throughout the extraction process.
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Recibido para evaluación: Diciembre 10 de 2004. Aprobado para publicación: Febrero 10 de 2005.
1 M. Sc. Especialista en Biotecnología, Grupo de Investigación ASUBAGROIN FCA Unicauca.
Correspondencia:biotecnologia@unicauca.edu.co
PALABRAS CLAVE:
Marcadores moleculares, extracci
ón de ADN, biología molecular,
diversidad genética.
KEY WORDS:
Molecular markers, ADN extraction,
PCR, molecular biology, genetic
diversity.
INTRODUCCIÓN
Los marcadores moleculares o
marcadores ADN revelan sitios de
variación naturales a nivel de secuencia
de ADN. A diferencia de los
marcadores controlados por genes
asociados acaracteres morfoló-
gicos (fenotipos de fácil identificaci
ón visual), las variaciones en los
marcadores de ADN no se muestran
por sí mismas en el fenotipo,
MARCADORES MOLECULARES Y LA EXTRACCIÓN DE ADN
MOLECULAR MARKERS AND THE DNA EXTRACTION
REINALDO VELASCO MOSQUERA1
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Facultad de Ciencias Agropecuarias
Vol 3 No.1 Marzo 2005
porque pueden ser diferencias en un solo nucleótido
delgen o en un pedazo de ADN repetitivo.
Los marcadores moleculares relacionados a una caracter
ística específica son de par ticular interés porque
permiten identificar individuos que contengan
esa característica y diferenciarlos de los que no la
posean, es decir que dan información sobre la diversidad
genética. Esto es un aspecto esencial en el
campo de la biología tanto aplicada comofundamental:
Ecología, Biología de la Evolución, Taxonom
ía, Agronomía, Biotec-nología, Microbiología,
Genética, etc (1).
Un gran número de técnicas moleculares puede ser utilizado
para obtener marcadores de diversidad mediante la
detección de polimor-fismo a nivel de ADN (2).
La mayoría de los marcadores moleculares se clasifican
en dos categorías de técnicas que se basan en la hibridaci
ón o enla Reacción en Cadena de la Polimerasa. PCR:
Marcadores detectados por hibridación.
Dentro de estos se agrupan las técnicas que emplean
sondas para la detección de los marcadores. Las sondas
son fragmentos de ADN o ARN que contienen el código
complementario para una secuencia específica del
genoma. Las técnicas más usuales son: Polimorfismo
en la longitud de los fragmentos de restricción(RFLP),
Número variable de repeticiones en tandem (VNTR) y ADNShips
(Oligonucleotide arrays) (1).
Marcadores basados en la PCR.
Los marcadores identificados por amplificación del ADN
están basados en la reacción en cadena de la polimerasa.
La introducción de esta tecnología permitió nuevas posibilidades
para la detección del polimorfismo genético
(3). El polimosrfismo se observa debido a quela variaci
ón en la secuencia del genoma altera los sitios de reconocimiento
del “primer”. Permite la generación de
grandes números de marcadores, su utilización n o es
técnicamente difícil y solo utiliza mínimas cantidades de
material genético. Las técnicas basadas en la PCR difieren
entre sí en la longitud y secuencia de los primers
empleados, condiciones de la PCR y en el método de...