Ingeniería Bioquímica
Páginas: 8 (1805 palabras)
Publicado: 7 de diciembre de 2012
UNIVERSIDAD AUTONOMA DE COAHUILA
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLOGICAS
PRACTICA 4
TINCION SIMPLE Y TINCION DIFERENCIAL DE GRAM
Mayela Alvarado Martínez Fanny Vianey Obregón Jiménez
03/10/2012--- 10/10/2012Matrícula: 11700571 3er Sem.
Torreón, Coahuila
OBJETIVO:
El alumno aprenderá a aplicar prácticamente los métodos de tinción más usados y observará su aplicación.
INTRODUCCIÓN
TINCION SIMPLE O SENCILLA:
Se realiza utilizando un solo colorante. Se suele emplear cualquier colorante básico, preferentemente azul de metileno o fuchina, dejándolo actuar Durante untiempo variable, de 1 a 2 minutos, y eliminando el exceso por lavado. Una vez seca la preparación, se visualiza a microscopio.
Este tipo de tinción ofrece orientación sobre la presencia, concentración. Morfología y modo de agrupación bacteriana.
TINCION DIFERENCIAL DE GRAM:
La tinción diferencial requiere más de un tipo de colorante y se utiliza para distinguir entre varios tipos decélulas bacterianas. Una tinción diferencial típicamente consiste de tres pasos principales: primero un colorante primario, el cual se utiliza para teñir a todas las células en la tinción; enseguida un paso de decoloración, el cual remueve el colorante solo de ciertos tipos de células y finalmente un colorante de contraste, el cual tiñe las células recién decoloradas pero no tiene efecto sobre lascélulas que aún retienen el colorante primario.
La tinción propuesta por el médico danés Christian Gram en 1884, es una de las tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, que clasifica los cultivos bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas. La reacción de la tinción de Gram se basa en la cantidad de peptidoglucano que se encuentra en las paredescelulares de estas bacterias. Las bacterias Gram positivas tienen muchas capas de peptidoglucano, las cuales a su vez, sostienen moléculas de ácido teicoico. El ácido teicoico reacciona con el cristal violeta y el yodo utilizado en este proceso de tinción. Un complejo de las moléculas cristal violeta-yodo-ácido teicoico es muy difícil de remover. Como la pared celular de las células Gram positivas retieneestos compuestos, es más difícil decolorar una célula Gram positiva que una Gram negativa. Una mezcla de alcohol remueve el cristal violeta de la célula Gram negativa, pero no de la Gram positiva. Esta mezcla de alcohol también disuelve mucho de la capa exterior de lipopolosacárido de la pared celular de la pared Gram negativa, lo cual acelera la remoción del colorante primario cristal violetade estas células.
Cuando otro colorante, usualmente Safranina, se añade, las células Gram positiva siguen de color azul-violeta mientras que las Gram negativas absorben el color rojizo de la Safranina. Al final del procedimiento de tinción, las células Gram positivas serán del color del cristal violeta, o colorante primario, y las células Gram negativas serán del color de la Safranina que esel colorante de contraste.
INTRODUCCION (ANEXA)
Los tres colorantes más comúnmente usados en las tinciones microbiológicas son la Fuscina fenicada, el azul de metileno y el violeta de genciana o cristal violeta. Cualquiera de estas soluciones pueden ser empleadas solos o combinadas con otros colorantes y productos químicos, en cualquiera de los muchos métodos especiales de tinción.
Losmicrobiólogos dividen los colorantes en ácidos, básicos y neutros; con el uso de estos colorantes la mayoría de las células bacterianas intactas se tiñen profundamente y uniformemente como en los núcleos de las células de vegetales y animales superiores.
En las tinciones simples solamente se usa uno de estos tipos de colorantes para teñir las estructuras celulares.
El método de coloración...
ESCUELA DE CIENCIAS BIOLOGICAS
PRACTICA 4
TINCION SIMPLE Y TINCION DIFERENCIAL DE GRAM
Mayela Alvarado Martínez Fanny Vianey Obregón Jiménez
03/10/2012--- 10/10/2012Matrícula: 11700571 3er Sem.
Torreón, Coahuila
OBJETIVO:
El alumno aprenderá a aplicar prácticamente los métodos de tinción más usados y observará su aplicación.
INTRODUCCIÓN
TINCION SIMPLE O SENCILLA:
Se realiza utilizando un solo colorante. Se suele emplear cualquier colorante básico, preferentemente azul de metileno o fuchina, dejándolo actuar Durante untiempo variable, de 1 a 2 minutos, y eliminando el exceso por lavado. Una vez seca la preparación, se visualiza a microscopio.
Este tipo de tinción ofrece orientación sobre la presencia, concentración. Morfología y modo de agrupación bacteriana.
TINCION DIFERENCIAL DE GRAM:
La tinción diferencial requiere más de un tipo de colorante y se utiliza para distinguir entre varios tipos decélulas bacterianas. Una tinción diferencial típicamente consiste de tres pasos principales: primero un colorante primario, el cual se utiliza para teñir a todas las células en la tinción; enseguida un paso de decoloración, el cual remueve el colorante solo de ciertos tipos de células y finalmente un colorante de contraste, el cual tiñe las células recién decoloradas pero no tiene efecto sobre lascélulas que aún retienen el colorante primario.
La tinción propuesta por el médico danés Christian Gram en 1884, es una de las tinciones diferenciales más utilizadas en bacteriología, que clasifica los cultivos bacterianos de menos de 24 horas en Gram positivas y Gram negativas. La reacción de la tinción de Gram se basa en la cantidad de peptidoglucano que se encuentra en las paredescelulares de estas bacterias. Las bacterias Gram positivas tienen muchas capas de peptidoglucano, las cuales a su vez, sostienen moléculas de ácido teicoico. El ácido teicoico reacciona con el cristal violeta y el yodo utilizado en este proceso de tinción. Un complejo de las moléculas cristal violeta-yodo-ácido teicoico es muy difícil de remover. Como la pared celular de las células Gram positivas retieneestos compuestos, es más difícil decolorar una célula Gram positiva que una Gram negativa. Una mezcla de alcohol remueve el cristal violeta de la célula Gram negativa, pero no de la Gram positiva. Esta mezcla de alcohol también disuelve mucho de la capa exterior de lipopolosacárido de la pared celular de la pared Gram negativa, lo cual acelera la remoción del colorante primario cristal violetade estas células.
Cuando otro colorante, usualmente Safranina, se añade, las células Gram positiva siguen de color azul-violeta mientras que las Gram negativas absorben el color rojizo de la Safranina. Al final del procedimiento de tinción, las células Gram positivas serán del color del cristal violeta, o colorante primario, y las células Gram negativas serán del color de la Safranina que esel colorante de contraste.
INTRODUCCION (ANEXA)
Los tres colorantes más comúnmente usados en las tinciones microbiológicas son la Fuscina fenicada, el azul de metileno y el violeta de genciana o cristal violeta. Cualquiera de estas soluciones pueden ser empleadas solos o combinadas con otros colorantes y productos químicos, en cualquiera de los muchos métodos especiales de tinción.
Losmicrobiólogos dividen los colorantes en ácidos, básicos y neutros; con el uso de estos colorantes la mayoría de las células bacterianas intactas se tiñen profundamente y uniformemente como en los núcleos de las células de vegetales y animales superiores.
En las tinciones simples solamente se usa uno de estos tipos de colorantes para teñir las estructuras celulares.
El método de coloración...
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