inhibicion enzimatica intro






Inhibición de la actividad enzimática
Bioquímica














Autores: Catalina Guaico, Consuelo Ríos
Docentes: Margarita Godoy, Ayudante: Camilo Pinto
Sección: 1.1Fecha: 26/05/2014
Introducción

Las enzimas son moléculas principalmente constituidas por proteínas, son biocatalizadores (es decir compuestos de origen biológico) que aceleran las reaccionesquímicas, las enzimas también participan en muchos mecanismos de regulación que de este modo permiten que el metabolismo se adapte a diferentes situaciones (1). En todas las reacciones catalizadas porenzimas, el primer paso es la unión del sustrato al enzima para formar lo que es llamado el complejo enzima-sustrato y luego disociar el sustrato para convertirlo en producto (2). Las enzimas se clasificanen diferentes familias, como por ejemplo la fosfatasa ácida, dentro de la cual encontramos la fosfatasa ácida de germen de trigo la cual actúa como una hidrolasa, debido a que tiene la capacidad dehidrolizar moléculas en presencia de agua para formar productos que en condiciones alcalinas pueden ser cuantificados midiendo su absorbencia (3).
Objetivos
Conocer la enzima fosfatasa ácida degermen de trigo y como actúa en condiciones salinas
Comprender como actúa la enzima en presencia de su sustrato.
Analizar y realizar la cuantificación de esta enzima a través del método de absorbencia.Procedimiento
-Rotular 5 tubos de ensayo que contengan las siguientes soluciones:
-Tubo 1: Agregar 2,5ml de buffer citrato pH 5 y 1,0ml de pNpp (p-nitrofenil) 2,5mM.
-Tubo 2: Agregar 2,0ml debuffer citrato pH5 5 y 1,0ml de pNpp 2,5mM
-Tubo 3: Agregar 1,0ml de buffer citrato pH 5, 1,0ml de pNpp 2,5mM y 1,0ml de CuSO4 40mM.
-Tubo: 4: Agregar 1,5ml de buffer citrato pH5, 1,0ml de pNpp2,5mM y 0,5ml de NaPO4 5mM
-Tubo 5: Agregar 1,0ml de buffer citrato pH 5, 1,0ml de pNpp 2,5mM y 1,0ml de NaPO4 5mM.
-Luego pre-incubar 5 minutos a 37°C y agregar a todos los tubos 0,50ml de enzima...