Inmovilizacion de enzimas

INMOVILIZACIÓN DE CÉLULAS

I. INTRODUCCIÓN

La inmovilización de enzimas es un proceso en el que se confina o localiza a la enzima en una región definida del espacio para dar lugar a formasinsolubles que retienen su actividad catalítica y que pueden ser reutilizadas repetidamente (1).

Como ventajas del empleo de enzimas inmovilizadas podemos destacar:

1. El aumento de la estabilidadde la enzima.

2. La posible reutilización del derivado, por lo que disminuyen los costes del proceso.

3. La posibilidad de diseñar un reactor enzimático de fácil manejo y control, adaptado a laaplicación de la enzima inmovilizada (1).

Las levaduras se inmovilizaron por atrapamiento utilizando como soporte agar agar 3%.; el objetivo de esta práctica fue de inmovilizar levaduras en agaragar 3%.

MATERIALES Y MÉTODO

a. MATERIALES:

Muestra biológica:

• Cepa de levadura

Material de laboratorio:

• 1 vaso de precipitación de 800 ml

• ½ L de aceite• 2 paquetes de hielo triturado

• 6 pipetas con la punta rota de 10 ml estéril

• 1 pipeta de 1 ml estéril

• 1 cocinita eléctrica

• 5 perlas de vidrioestéril

• 1 ollita

• 1 colador grande

• 1 bowl de aluminio

• 1 frasco de vidrio estéril

Medio de cultivo:

• 100 ml de Agar Agar 3%

• 4 L de aguadestilada estéril

• 4 L de agua corriente estéril

• 1 frasco Schott con 50 ml de Caldo Sabouraud

• 1 placa petri con Agar Sabouraud con cloranfenicol

• 4 tubos con 9ml de SSF

b. MÉTODO (fig.1):

• Reactivación y proliferación celular: sembrar por superficie en una placa con PDA, incubar a temperatura ambiente por 3 días.

• Cosecha celular: colocar 3ml de caldo Sabouraud en la placa sembrada y 5 perlas de vidrio estéril.

• Preparación del inóculo: colocar los 3 ml en el frasco schoot con caldo Sabouraud, incubar en agitación por 24 horas...