inmuno10
Páginas: 5 (1146 palabras)
Publicado: 3 de noviembre de 2015
Facultad de Ciencias Médicas y de la Salud.
Dr. William C. Gorgas
LABORATORIO # 10.
Inmunodeficiencia: HIV 1 y HIV 2
Gabriela Sieiro
8-891-2424
semestre: 2015-1
fecha: 25 de marzo de 2015
Preguntas
1.- Presente un dibujo de los resultados obtenidos en el Laboratorio y explique, el principio del o los métodos empleados en la práctica.
Prueba de Cassette: Ensayosinmunocromatográficos lineales, para la detección cualitativa de anticuerpos de HIV1/2. El suero o plasma se añade al pocillo la superficie lo absorbe, mientras la muestra traspasa el conjugado se reconstituye y se mezcla con los antígenos recombinantes, al darse la reacción aparece una barra roja en el siguiente pocillo y luego la del control. Resultado positivo está dado por raya roja encontrol y muestra y el negativo por raya roja solo en control. Se considera inválida si no hay ninguna raya o solo la hay en la muestra.
2.- Presente un dibujo del VIH con todas sus partes señaladas.
Investigación o Autoformación
1. Presente un cuadro de las cifras nacionales de esta enfermedad en Panamá, actualizado al presente año.
2. Existen Pruebas de tamizaje o descarte (rápidas o máselaboradas) al igual que pruebas confirmatorias. Mencione algunas y explique brevemente, las diferencias entre unas y otras.
El diagnóstico se basa en la demostración de los Ac anti HIV, de alguno de sus componentes o de ambos. Los Ac anti HIV suelen aparecer en la circulación de 4 a 8 semanas después de la infección.
La prueba convencional es el ELISA que tiene una sensibilidad del 99.5% sinembargo su especificidad es baja, los resultados se expresan como: 1) Positivas (reación intensa), Negativas (reacción nula) o Indeterminadas (reacción parcial). Debido a la baja especificidad cuando tenemos un ELISA + o no concluyente se debe realizar otra prueba: Transferencia de Western. Es una discriminación de los antígenos del VIH frente a los que se dirigen los anticuerpos presentes en lamuestra.
Western Blot: Básicamente se basa en la separación de las proteínas, antígenos obtenidas del VIH-1 procedentes del lisado del cultivo del virus y purificadas por centrifugación. La proteína viral así obtenida se coloca en un gel de poliacrilamida en forma de láminas delgadas y luego se efectúa una electroforesis con la que las proteínas de menor peso molecular, p17 y p24, emigran más lejosen el gel, mientras que las de mayor peso molecular se mantiene cerca de su lugar de depósito. Posteriormente, se transfieren a una tira de nitrocelulosa y se cortan en tiras de unos 5 mm de ancho. Estas son las tiras que se exponen al suero humano diluido, después de una incubación se lavan y se vuelven a incubar con una IgG antihumana marcada con una enzima que con la exposición a un reveladorenzimático producirá una banda coloreada en las zonas correspondientes a los anticuerpos específicos que contenga la muestra.De un modo muy esquemático se puede decir que el WB puede ofrecer tres tipos de resultados diferentes: positivo: Cuando cumple los criterios de positividad adoptados por la técnica que se está empleando (presencia de ciertas bandas), negativo: cuando ninguna de las bandaspresenta reacción, indeterminado: cuando no es positivo o negativo.
Tanto la prueba rápida como el ELISA buscan la presencia de los anticuerpos contra el VIH en la sangre. Igual que todas las pruebas de tamizaje (incluido el ELISA), un resultado del VIH reactivo debe confirmarse antes de que se pueda administrar un diagnóstico de la infección.
Además del ELISA, otras pruebas ahora disponiblesincluyen:
El ensayo de radioinmunoprecipitación (RIPA): Un análisis de sangre confirmatorio que puede usarse cuando los niveles del anticuerpo son muy bajos o difíciles de detectar o cuando los resultados de la prueba de transferencia de Western son inciertos. Una prueba costosa, el RIPA requiere tiempo y pericia para realizar.
El ensayo rápido de aglutinación de látex: Un análisis de sangre...
Facultad de Ciencias Médicas y de la Salud.
Dr. William C. Gorgas
LABORATORIO # 10.
Inmunodeficiencia: HIV 1 y HIV 2
Gabriela Sieiro
8-891-2424
semestre: 2015-1
fecha: 25 de marzo de 2015
Preguntas
1.- Presente un dibujo de los resultados obtenidos en el Laboratorio y explique, el principio del o los métodos empleados en la práctica.
Prueba de Cassette: Ensayosinmunocromatográficos lineales, para la detección cualitativa de anticuerpos de HIV1/2. El suero o plasma se añade al pocillo la superficie lo absorbe, mientras la muestra traspasa el conjugado se reconstituye y se mezcla con los antígenos recombinantes, al darse la reacción aparece una barra roja en el siguiente pocillo y luego la del control. Resultado positivo está dado por raya roja encontrol y muestra y el negativo por raya roja solo en control. Se considera inválida si no hay ninguna raya o solo la hay en la muestra.
2.- Presente un dibujo del VIH con todas sus partes señaladas.
Investigación o Autoformación
1. Presente un cuadro de las cifras nacionales de esta enfermedad en Panamá, actualizado al presente año.
2. Existen Pruebas de tamizaje o descarte (rápidas o máselaboradas) al igual que pruebas confirmatorias. Mencione algunas y explique brevemente, las diferencias entre unas y otras.
El diagnóstico se basa en la demostración de los Ac anti HIV, de alguno de sus componentes o de ambos. Los Ac anti HIV suelen aparecer en la circulación de 4 a 8 semanas después de la infección.
La prueba convencional es el ELISA que tiene una sensibilidad del 99.5% sinembargo su especificidad es baja, los resultados se expresan como: 1) Positivas (reación intensa), Negativas (reacción nula) o Indeterminadas (reacción parcial). Debido a la baja especificidad cuando tenemos un ELISA + o no concluyente se debe realizar otra prueba: Transferencia de Western. Es una discriminación de los antígenos del VIH frente a los que se dirigen los anticuerpos presentes en lamuestra.
Western Blot: Básicamente se basa en la separación de las proteínas, antígenos obtenidas del VIH-1 procedentes del lisado del cultivo del virus y purificadas por centrifugación. La proteína viral así obtenida se coloca en un gel de poliacrilamida en forma de láminas delgadas y luego se efectúa una electroforesis con la que las proteínas de menor peso molecular, p17 y p24, emigran más lejosen el gel, mientras que las de mayor peso molecular se mantiene cerca de su lugar de depósito. Posteriormente, se transfieren a una tira de nitrocelulosa y se cortan en tiras de unos 5 mm de ancho. Estas son las tiras que se exponen al suero humano diluido, después de una incubación se lavan y se vuelven a incubar con una IgG antihumana marcada con una enzima que con la exposición a un reveladorenzimático producirá una banda coloreada en las zonas correspondientes a los anticuerpos específicos que contenga la muestra.De un modo muy esquemático se puede decir que el WB puede ofrecer tres tipos de resultados diferentes: positivo: Cuando cumple los criterios de positividad adoptados por la técnica que se está empleando (presencia de ciertas bandas), negativo: cuando ninguna de las bandaspresenta reacción, indeterminado: cuando no es positivo o negativo.
Tanto la prueba rápida como el ELISA buscan la presencia de los anticuerpos contra el VIH en la sangre. Igual que todas las pruebas de tamizaje (incluido el ELISA), un resultado del VIH reactivo debe confirmarse antes de que se pueda administrar un diagnóstico de la infección.
Además del ELISA, otras pruebas ahora disponiblesincluyen:
El ensayo de radioinmunoprecipitación (RIPA): Un análisis de sangre confirmatorio que puede usarse cuando los niveles del anticuerpo son muy bajos o difíciles de detectar o cuando los resultados de la prueba de transferencia de Western son inciertos. Una prueba costosa, el RIPA requiere tiempo y pericia para realizar.
El ensayo rápido de aglutinación de látex: Un análisis de sangre...
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