inmunofluoresecia

Páginas: 4 (790 palabras) Publicado: 3 de julio de 2013
INMUNOFLUORESCENCIA

Que es la fluorescencia?

…..Es la propiedad de una sustancia de emitir
luz cuando es expuesta a radiaciones de baja
longitud de onda y alta energía (UV – Rx). Lasradiaciones absorbidas (invisibles al ojo), son
transformadas en luz visible, o sea de una
longitud de onda mayor a la incidente.

Como se produce la fluorescencia?
La absorción de luz por parte de lamolécula de
fluorocromo la eleva a un estado de exitación en el cual
contiene mayor energía.
La molécula permanece en el estado de exitación por un
período de tiempo muy corto.
El retorno a unnivel de energía menor es acompañado por
emisión de luz (fluorescencia)

Inmunofluorescencia Directa
El procedimiento se realiza en un paso básico de reacción.
La muestra clínica quepresuntamente contiene
antígenos del microorganismo bajo estudio es puesta en
contacto con un anticuerpo monoclonal dirigido contra
dicho microorganismo conjugado con fluoresceína. Si el
antígeno esperadoestá presente se formará un
complejo antígeno-anticuerpo. La reacción positiva en
forma de fluorescencia verde manzana puede verse con
la ayuda de un microscopio de fluorescencia.

Esquema de latécnica

Inmunofluorescencia Indirecta
Es una técnica de doble capa en donde se aplica el anticuerpo sin
marcar directamente sobre el sustrato de tejido y se visualiza
por tratamiento con un sueroanti-inmunoglobulina conjugado con
fluorocromo
El proceso consta de dos etapas:
Primera etapa: se fijan sobre un portaobjetos los antígenos que
constituyen el substrato conocido específico (célulasque
contiene virus, T. gondii, T. pallidum, etc.) sobre él se coloca
el suero de quien se sospecha la presencia de anticuerpos
específicos, si la reacción es positiva se dará formación decomplejo antígeno-anticuerpo no visible ya que el anticuerpo no
estaba marcado
Segunda etapa: se agrega una anti-inmunoglobulina humana
marcada, que reaccionará con el anticuerpo del complejo...
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