Inmunohistoquimica

INMUNOHISTOQUIMICA
INMUNOHISTOQUIMICA
Dra. Elizabeth Orellana
Patóloga

INMUNOHISTOQUIMICA
INMUNOHISTOQUIMICA
Técnica que combina la histología con
con
la inmunología en la determinación de
la
de
antígenos celulares (su presencia y
ant genos
localización micro anatómica).
localizaci

Utilidades
1. Determinación de linaje (histogénesis /
1.
histoatipia).
histoatipia
* A.Clasificación neoplasia
neoplasia
indiferenciada.
* B. Determinación de origen en
B.
de
enfermedad metastásica de
metast
de
primario no clasificable.

2. Selección de regimenes terapéuticos:
2.
* A. Neoplasias hormono dependientes
(receptores hormonales).
(receptores
* B. Oncoproteínas sensibles a
medicamentos específicos.
medicamentos
Her 2 Neu
CD117

3. Ayuda Pronóstica
3.* Metástasis ocultas
* Resistencia quimioterapéutica
* Mutaciones (p53)
* Indicadores de trasformación (células
mioepiteliales, células basófilas).
* Indicadores de proliferación celular y
clonal
· Ki67
· Antígeno nuclear de proliferación
nuclear

4. Diagnóstico en Enfermedades
4.
Infecciosas:
Infecciosas:
* Virus – Hepatitis, HPV, Hiv-1, Herpes.
* Bacterias – Histoplasma.
*Hongos – Criptococo.
* Protozoos – Giardia, Amebas.

Materiales
Materiales
Materiales (sustrato):
Materiales
1. Se utiliza tejido “viable antigenicamente”
Se
fijado en formol u otro y procesado en
fijado
parafina.
parafina.
2. Productos de citología.
3. Tejido congelado.

Metodología
Metodolog
Altos estándares en control de calidad.
Altos
Ambiente:
Ambiente:
Temperatura.Temperatura.
Humedad.
Humedad.
Iluminación.
Iluminaci
Nivelación.
Nivelaci

Equipo:
Equipo:
Cuchillas descartables
Cuchillas
Procesador de tejidos (+ baño de
Procesador
parafina)
Incubadora
Incubadora
Cámaras de humedad
Cámara de termorregulación

Materiales:
Materiales:
Reactivos:
Reactivos:
Solución de rescate antigénico
Soluci
Enzimas proteolíticas (predigestiónEnzimas
proteasa)
Buffer
Buffer
Controles negativos y positivos
Controles
Anticuerpos:
Anticuerpos:
Concentración (dilución)
Concentraci
Especifidad y sensibilidad
Especifidad

MAQUINA DE IPX

HISTORIA DE LA
INMUNOHISTOQUIMICA
INMUNOHISTOQUIMICA

1940
1940

Coons

1942
1942

Coons;
Creech, Jone
Creech Jone

1965

Sternberg

1966

Graham,
Karnovski
KarnovskiDetección Ag con Ac
Ag con Ac
fluorescentes en cortes
fluorescentes
congelados.
Ac. Secundarios (Ag
Pneumococo)
Detección de Ac con metales
de Ac con
pesados (Uranium)
pesados
Utilización de enzimas PEROXIDASA

1697

Nakane, Pierce
Pierce

Utilización de complejos de Ac y enzimas
de
Ac enzimas
INMUNOPEROXIDASA

1970
1970

Sternberg

Utilización de Peroxidasas /Antiperoxidasas (PAP) Ag + Ac
de Peroxidasas Antiperoxidasas (PAP) Ag Ac
Primario + Ac Secundario + PAP
Primario Ac

1974
1974

Heitzman &
Richardson
Richardson

Desarrollo del Método
todo
Avidina – Biotina,
Avidina Biotina,
Streptoavidina – Biotina
Biotina
Uso de digestión
enzimática – Proteasas –
enzim
Proteasas

1975
1975

H Uang
Uang

1976

Strauss
I Simposio Mundialen Amsterdam
en Amsterdam

Inhibición peroxidasas
peroxidasas
endógenas

1979

Heydeerman E.
E.

Controles

1987
1987

Kelly J; Whelan
J; Whelan

Ac. Monoclonales
Monoclonales

1988
1988

Leong As.
As.

Utilización Microondas (altas temperaturas)
Utilizaci Microondas

1991
1991

Frankel, Shi, Conrat
Shi Conrat

Técnicas de Rescate Antigénico
nico

Shi, ImanIman
Autoclave, STeamer)
STeamer

pH, Ac Monoclonales, Rescate (Olla de Presión, Microondas,
Ac
n,

1995 –
1996

INMUNOHISTOQUIMICA
EN GUATEMALA
EN

1986
1986

Dr. Miguel A. Garcés
Panel Aproximadamente de 10 Ac
Ac
* Desconicimiento de la técnica y sus aplicaciones
cnica
* Costos – Paneles
Costos Paneles
* Reacciones Cruzadas
Reacciones

1989 –
1995

1998
1998...