Inmunoreaccion

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
E.A.P. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

REACCIÓN DE FEULGEN- SCHIFF

CURSO : GENÉTICA GENERAL

DOCENTE : Ms.C. GINA ZAVALETA ESPEJO

ESTUDIANTE : CHÁVEZINFANTE, Ángela Amada

CICLO : V

GRUPO : A

TRUJILLO - PERÚ
2012

REACCIÓN DE FEULGEN – SCHIFF
I. MARCO TEÓRICO
Identificación de DNA
El fundamento de este método se basa en laidentificación altamente específica de ácidos nucleicos del ADN a partir del reconocimiento de los grupos aldehídos de la pentosa (azúcar). Para esto se realizan 2 pasos fundamentales:
1) Hidrólisisácida:
Se utiliza para romper los puentes de hidrogeno que unen a la doble hélice, mediante la desnaturalización de la cadena. Para esto se utiliza ácido clorhídrico (HCl), que es el componente reactivomas critico del método, controlando la concentración del ácido, temperatura y tiempo, que depende del tipo de tejido (compactación de cromatina) y fijador empleado.
Durante la hidrólisis ácidasuave la mayor parte del RNA se divide en sustancias solubles y se pierde del tejido, sin ser removidos los grupos ribosil debido a la presencia de un grupo hidroxilo en la posición 2' de la ribosa, porlo que, este material no reacción posteriormente con el reactivo de Schiff. Mientras tanto el DNA es parcialmente hidrolizado siendo removidas y liberadas las bases púricas (A y G) de los residuos dedeoxiribosa (depurinización) formando ácido apurínico y generando grupos aldehído (CHO) en el C1 de la pentosa, donde se encontraba unida la base nitrogenada.
Fenomenos moleculares de la exposiciondel DNA a la Hidrólisis Acida

Este es un paso crítico por lo que hay que tener en cuenta las variables de tiempo de exposición a la hidrólisis acida, pH ([ H+]) al que se lleve a cabo la reacción,temperatura, el fijador utilizado en el tejido y el grado de compactación de la cromatina que depende de la naturaleza del tejido.
2) Tinción con Reactivo de Schiff:
Los grupos aldehídos...