Inserción De Los Fragmentos De Adn
Los vectores declonación son pequeñas moléculas de ADN, que tienen capacidad para autorreplicarse dentro de las células hospedadoras.
Se utilizan con frecuencia dos tipos de vectores de clonación: plásmidos y virus.de introducirlos en las células hospedadoras.
* Plásmidos. Son moléculas de ADN circular, con un tamaño menor que el del cromosoma. Se replican con independencia del cromosoma bacteriano ya quetienen su propio origen de replicación.
Figura a | En esta secuencia de dibujos se puede ver como se realiza la inserción de un gen en un plásmido.
En la figura a tenemos un gen(color rojo) queinteresa insertar en un plásmido (color turquesa) |
*
Figura b | En la figura b, vemos como una enzima de restricción ha cortado el gen y el plásmido, quedando unos bordes cohesivos o pegajosos. |*
Figura c | La unión del ADN que contiene el gen que se desea clonar con el vector de clonación, se realiza por medio de otras enzimas, denominadas ADN-ligasas, que unen ambos trozos de ADN.El resultado es una molécula de ADN recombinante, ya que contiene fragmentos de ADN de distinta procedencia. |
Bacteriófagos. El proceso es similar, se trata de insertar el gen deseado en unfragmento de ADN vírico (figura d) Posteriormente se ensamblarán las distintas partes del virus (figura e). Así quedará el virus completo(figura f). En el siguiente paso se insertará este ADN por el procesode la TRANSDUCCIÓN.
figura d | | figura e | | figura f |
Cósmidos . Son plasmidos que contienen el fragmento de ADN deseado que posee un borde cohesivo procedente del genoma del fagolambda (extremo cos)y se empaqueta en el interior de un fago. Se construye el cssmido uniendo los tres elementos ginicos, y el resultado final es poder introducir en la cilula receptora fragmentos...
Regístrate para leer el documento completo.