instrumental

Analítica Instrumental: Fluorescencia

[Douglas_A._Skoog,_Donald_M._West]_Fundamentos_de_QuimicaAnaliticaV8.djvu,
Capitulo. 27

Estados vibracionales

Eficiencia cuántica:

kF = constante primer orden para relajación por Fluorescencia
Knr = constante de relajación no radiante
Producto fluorescente: Rendimiento alto
Producto no fluorescente: Rendimiento bajo

Especiesfluorescentes:
Moléculas aromáticas

Morin, extracto de Maclura pomifera/ tinctoria, Psidium guajava,
forma complejo con Al, Zn -> fluorescencia
Indicadores pH,
Titulación Fajans,
Marcadores biol.

Eosina

Fluoresceina

Intensidad de la Fluorescencia:

Fluorímetro:

A) Con filtros
B) Con monocromadores

emisión

Instrumentación

Instrumentación

Fluorescencia Rayos X:Determinación de elementos

RAMAN

http://es.wikipedia.org/wiki/Espectroscopia_Raman

Métodos ópticos no espectrométricos

Refracción
Polarimetría
Dispersión

Refracción
Material

Índice de
refracción

Vacio

1

Vidrio

1,5 – 1,6

Agua

1,333

Diamante

2,417

Ley de Snell:

Forma de Refracción:

Refractómetro

Determinación de:
•Azúcar (Brix, Plato)•Salinidad
•Conc. Acido batería
•Conc. Aceite/agua
•Pureza de mat. prima

Refractómetro

Polarimetría
Medición de rotación de luz polarizada por un medio ópticamente activo

Lamina de polarización

LCD

Polarimetro

Rotación especifica

Liquido puro

a=o
l = dm
 = g/ml
T = oC
l = nm, 589nm = “D”

Rotación especifica

Soluciones

a=o
l = dm
c = g/ml (g/100ml)
T = oCl = nm, 589nm = “D”

Rotación especifica

D-Fructosa: −92.4°
D-Glucosa: +52.5°
D-Sacarosa: +66.47°
D-Lactosa: +52.3°
Alcanfor: +44.1°

Dificultades:
Solución muy concentrada, alta rotación > 180o

Quiralidad

Quiralidad

Quiralidad

Dispersión

Tyndall

El efecto Tyndall es el fenómeno
físico que hace que las partículas
coloidales en una disolución o un gas seanvisibles al dispersar la luz.

Turbidimetría

Se mide la Absorción de Luz
En suspensiones, coloides.

Biología: numero de células en solución
Química: Titulación con precipitación:
- BaSO4
-AgCl
Quim. Ambiental: Sedimentación
Aceite en agua y vive versa
Ojo:
La Absorción depende de:
- tamaño de partículas
- concentración de partículas

Nefelometría

Se mide la Dispersión de LuzEn suspensiones, coloides.

Determinación de partículas en
Aguas a tratar, biomedicina.

Dispersión depende de:
•Concentración
•Tamaño
•Forma
•Índice refractivo de las partículas

Diferencia a UV-Vis y fluorescencia?

NTU:
Nephelometric Turbidity Unit
Unidad nefelométrica de turbidez
Descripción de calidad de agua

Muestras: 5, 50, 500 NTU
Medio

NTU

Agua ultra pura0,03

Agua potable

0,05 – 0,5

Aguas servidas/negras

100 – 2000

Formacina

4000

Leche (3,5% Grasa)

> 100.000

Leche (1,5% Grasa)

< 60.000

Aguas servidas/negras
tratadas

0,5 - 10

Cromatografía

Componentes:
•Fase estacionaria
•Fase móvil
•Producto a separar

Cromatografía:
• Capa fina (TLC)
• en Columna (Flash)
• de Gases (GC)
• de Líquidos (HPLC)
• deIones (IC)
•…….

Cromatografía

•Retención selectiva
•Coeficiente de partición
•Tiempo de retención

Sustancia 1 y sustancia 2 son inmiscibles

Fundamentos de Química Analítica, 8va Edición - Douglas A. Skoog, D. M. West, F. J. Holler,
p 931 ff

Cromatografía
Método de separación de mezclas
Separación por diferencias de velocidad
Diferencias de velocidad por diferencia
demiscibilidad de componentes en fase
móvil y fase estacionaria.

Cromatografía en columna:
Flujo de arriba para abajo por
Gravedad o presión

Cromatografía plana:
Flujo de abajo hacia arriba por
Fuerzas capilares

Cromatografía de gases:
Flujo por corriente de gas como fase móvil: He o N2

Cromatografía liquida HPLC:
Flujo por corriente de liquido puro o mezcla como fase móvil...