interferentes

ANÁLISIS DE POTENCIALES INTERFERENTES EN LA DETERMINACIÓN DE PROTEÍNAS


En toda determinación cuantitativa, la propiedad medible del analito (compuesto a analizar) de una muestra problema secompara con un patrón de concentración conocida que generalmente es una solución pura del analito. Sin embargo, rara vez se da el caso de que una muestra problema contenga solamente el analito deinterés. Por lo general, están presentes un gran número de otros compuestos que pueden interferir positiva o negativamente en la propiedad medible. Para esto se analizará la posible interferencia de glucosa,NaCl y laurilsulfato de sodio (SDS) sobre la determinación de proteínas con el método Bradford.

• Se necesitan 100 mL de las siguientes soluciones:

a) Glucosa al 20% p/v
b) NaCl al 20% p/v
c)SDS al 1% p/v
d) BSA 500 μg/mL

• Tome 2 puntos de la curva de calibración del método Bradford que se utilizaron en el laboratorio anterior, y que corresponden a las concentraciones de 20 y 80μg/mL de BSA.

• Para cada concentración, prepare un set de 7 tubos según las tablas siguientes, ajustando los volúmenes finales a 10 mL.



Tabla 1: Efecto de glucosa para concentración de BSA 20μg/mL

Tubo Glucosa
% p/v Glucosa
mL Solución
BSA mL Agua
mL
1 0 0 0 10
2 0 0 0.4 9.6
3 0.6 0.3 0.4 9.3
4 1
5 5
6 10
7 18









Tabla 2: Efecto de glucosa paraconcentración de BSA 80 μg/mL

Tubo Glucosa
% p/v Glucosa
mL Solución
BSA mL Agua
mL
1 0 0 0 10
2 0 0 1.6 8.4
3 0.6 0.3 1.6 8.1
4 1
5 5
6 10
7 15


Tabla 3: Efecto de NaCl paraconcentración de BSA 20 μg/mL

Tubo NaCl
% p/v NaCl
mL Solución
BSA mL Agua
mL
1 0 0 0 10
2 0 0 0.4 9.6
3 0.6 0.3 0.4 9.3
4 1
5 5
6 10
7 18


Tabla 4: Efecto de NaCl paraconcentración de BSA 80 μg/mL

Tubo NaCl
% p/v NaCl
mL Solución
BSA mL Agua
mL
1 0 0 0 10
2 0 0 1.6 8.4
3 0.6 0.3 1.6 8.1
4 1
5 5
6 10
7 15

Tabla 5: Efecto de SDS para...