Introducción A La Histología

de corte. También se advierte que el núcleo celular sólo aparecerá si el plano de sección pasa a
través del mismo.
La figura C muestra cortes longitudinales a distintos niveles de una estructura tubular.
Es importante notar como varía el aspecto tridimensional del corte, de acuerdo al nivel de sección.
La figura B
ilustra los
planos de
sección
transversal a
distintos
niveles, de
tresobjetos
multicelulares
diferentes.
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TÉCNICAS HISTOLÓGICAS
Los métodos para la obtención de preparaciones histológicas ocupadas en los estudios de
microscopia óptica, se engloban en la Técnica Histológica.
La Técnica Histológica abarca varios procedimientos a los que se somete un tejido para proporcionar
los cortes como se conocen, montados bajo un cubre objeto con imágenes de estructurascontrastadas, para su estudio bajo microscopia óptica o electrónica.
Los procedimientos de la Técnica Histológica se resumen en las etapas siguientes:
· Obtención de una MUESTRA DEL TEJIDO a estudiar; existen 2 formas:
Necropsia: Examen u obtención de tejido de un organismo muerto.
Biopsia:(del griego bios = vida y oasis = visión) Examen u obtención de tejido de un organismo
vivo.
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·FIJACIÓN, este proceso se refiere al tratamiento del tejido con sustancias químicas que
tienen varias finalidades:
1. Conservar los tejidos de forma que muestren el mayor parecido posible a su estado in vivo.
2. Aumentar la dureza del tejido para facilitar la preparación de finas películas de éste.
3. Destruir bacterias y gérmenes que pudieran encontrarse en ellos.
4. Interrumpir los procesoscelulares dinámicos que ocurren con la muerte celular.
Esto se logra al inactivar enzimas celulares, que de otra manera iniciarían la autolisis y llevarían a la
degeneración post mortem.
La fijación mantiene las estructuras al generar la formación de enlaces entre las proteínas
constituyentes del tejido.
Los agentes más usados para Microscopia de Luz son el Formaldehído al 5%, Bouin Holland yFormol al 10%.
· DESHIDRATACIÓN, después de que la muestra ha sido fijada se elimina el fijador y se
deshidrata.
Debido a que gran parte del tejido está constituida por agua, la muestra se somete a una serie
gradual de soluciones alcohólicas deshidratantes, en concentración creciente (de menor a mayor),
por ejemplo, Alcohol Etílico. Se inicia con alcohol al 70 %, continuando luego consoluciones al 80%,
90%, 96% y 100 % para eliminar el agua. Esto permite que el agua sea removida en forma lenta, sin
romper o deformar el tejido.
· ACLARAMIENTO O DIAFANIZACIÓN, luego de deshidratar el tejido, se somete a una
sustancia que es miscible, tanto con el alcohol como con el medio de inclusión a utilizar.
En la mayoría de los casos se utiliza como medio de inclusión Parafina líquida. Lasustancia
comúnmente utilizada para aclarar es el Xilol. El xilol sólo es soluble en alcohol al 100%. Se llama
aclaramiento ya que el tejido se torna transparente, esto se debe a que cambia su índice de
refracción.
NOTA: El alcohol y el xilol disuelven los lípidos de la célula, por lo cual al extraerse también se
extraen las grasas y los lípidos constituyentes de la célula.
· INCLUSIÓN OIMPREGNACIÓN, a fin de que se puedan obtener cortes suficientemente finos
para ser observados al microscopio.
Los tejidos tienen que ser incluidos y envueltos por una sustancia de consistencia firme. Las
sustancias usadas para este fin en microscopía óptica son la gelatina y la parafina.
El objeto de la inclusión es:
· Distinguir entre sí las células y la matriz extracelular, superpuestas en untejido.
· Tener un objeto lo suficientemente duro para su manejo y corte.
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La inclusión se logra al infiltrar la parafina liquida o cualquier medio de inclusión en estado líquido al
tejido, que disuelve el medio de aclaramiento y penetra en el tejido. Por lo general se coloca la
muestra de tejido en un recipiente y se le agrega la parafina fundida a 60-64º C, colocando la muestra
en una...