Introducción A La Cromatografía

INTRODUCCIÓN A LA CROMATOGRAFÍA
1. Introducción
La cromatografía es una técnica instrumental que permite separar los componentes de una muestra debido a su diferente afinidad entre dos fases inmiscibles entre sí, una estacionaria (líquida o sólida) y otra móvil (gas, líquida o un FSC). Las técnicas cromatográficas son muy variadas, pero en todas ellas hay una fase móvil que consiste en unfluido (gas, líquido o fluido supercrítico) que arrastra a la muestra a través de una fase estacionaria que se trata de un sólido o un líquido fijado en un sólido. Los componentes de la mezcla interaccionan en distinta forma con la fase estacionaria. De este modo, los componentes atraviesan la fase estacionaria a distintas velocidades y se van separando. Después de que los componentes hayan pasado porla fase estacionaria, separándose, pasan por un detector que genera una señal que puede depender de la concentración y del tipo de compuesto.

2. Clasificación
Podemos clasificar las técnicas de cromatografía de dos formas. La primera, según el modo en que se ponen en contacto las dos fases, se subdivide en dos:  Cromatografía plana. La FE siempre es sólida y la FM es un líquido. Existen dostipos cromatografía en papel (la FE es el complejo celulosa-papel) o en capa fina (La FE es un soporte sólido). Cromatografía en columna. La FE puede ser un sólido o un líquido y la FM puede ser un gas, un líquido o un fluido supercrítico (FSC).

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En la segunda, las cromatografías se clasifican según el fundamento de la separación cromatográfica:  SEGÚN LA NATURALEZA DE LA FE  Sólido: Lascromatografías se clasifican según el equilibrio que se produce y pueden ser: o Cromatografía de adsorción o Cromatografía de intercambio iónico o Cromatografía de exclusión por tamaño o Cromatografía de afinidad  Líquido o Cromatografía de partición o de reparto SEGÚN LA NATURALEZA DE LA FM  Líquido o Cromatografías líquido-líquido (CLL) o Cromatografía líquido-sólido (CLS)

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Gases o Cromatografía gas-líquido (CGL). Al hablar de cromatografía de gases estamos hablando de una CGL. Se producen equilibrios de repart. o Cromatografía gas-sólido. La utilidad de esta técnica es muy escasa y tiene un ámbito de aplicación muy reducido. FSC o Cromatografía FSC-líquido o Cromatografía FSC-sólido

TIPOS DE EQUILIBRIOS Equilibrios de Adsorción: Es un fenómeno superficial. Lafase estacionaria posee una serie de centros activos adsorbentes a los que se fija momentáneamente el analito arrastrado por la FM. Equilibrios de intercambio iónico: Estos equilibrios se suceden debido a fuerzas electrostáticas. La FE es un intercambiador de iones (un intercambiador de iones es una molécula que posee una parte con una carga determinada, positiva o negativa, y otra parte con uncontraión. El contraión se intercambia con el analito y así es como le retiene la FE. La FM también tiene un contraión. Equilibrios de exclusión por tamaño: En este caso la FE es un sólido polimérico que presenta una serie de poros a través de los cuales ha de pasar el analito. Los analitos de mayor tamaño son incapaces de pasar a través de los poros, por lo que saldrán antes, mientras que losanalitos de menor tamaño quedan retenidos entre los poros durante más tiempo, por lo que tardarán más en salir. Equilibrios de afinidad: Estos equilibrios se utilizan en bioquímica y son similares a los de adsorción, pero presentan coenzimas o ligandos específicos de bioquímica Equilibrios de reparto: Son equilibrios basados en la diferente solubilidad de los analitos.

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3. Tipos dedesarrollos
El desarrollo es el modo de llevar a cabo la cromatografía. Existen tres tipos, pero el que más se utiliza es el de elución.  Elución: Hacemos circular FM a través de la columna y posteriormente inyectamos la muestra que contiene al analito o analitos. Esta muestra se verá arrastrada por la FM por la columna y será los analitos serán retenidos por la FE en mayor o menor medida, hasta...