Investigacion

Páginas: 4 (757 palabras) Publicado: 12 de agosto de 2012
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
Para la ejecución de este procedimiento experimental, un estudiante procederá a extraer sangre de la vena del pliegue del codo de uno de sus compañeros, en cantidadaproximada de 6 cc.
Seguidamente se colocará dicha sangre en un tubo con dos gotas.
Se organizarán tres grupos de estudiantes los cuales tendrán cada uno un juego de tubos numerados del 1 al 11,colocados ordenadamente en la gradilla respectiva. Adicionalmente, cada grupo tendrá una de las tres soluciones salinas de trabajo que serán NaCl 0.75%, Agua destilada, las cuales serán empleadas parapreparar diluciones decrecientes de las mismas en los tubos numerados.
Seguidamente, agregar a cada tubo dos gotas de sangre y mezclar muy suavemente. Adicionalmente se preparará un tubo con 10 ml deagua destilada únicamente, al cual se le agregará dos gotas de la misma muestra de sangre. Este tubo será empleado como referencia de obtención de un 100 % de hemólisis.
Dejar los tubos en reposo porespacio de 10 minutos para que los eritrocitos reaccionen con la solución. Agitar suavemente de nuevo y centrifugar por 10 minutos a 2000 rpm en centrífuga clínica.
En compañía de su preparadordocente o del técnico de laboratorio, proceda a medir la absorbancia en el espectrofotómetro del laboratorio. Para ello, saque los tubos con cuidado de la gradilla y extraiga el sobrenadante con unapipeta Pasteur (TENGA MUCHO CUIDADO DE NO TOCAR EL BOTON DE ERITROCITOS QUE SE FORMO EN EL FONDO DEL TUBO) y colóquelo en la cubeta del espectrofotómetro destinada para tal fin, y lea el registro que leproporciona el equipo a 540 nm de longitud de onda.
* Anote los valores de absorbancia obtenidas para cada uno de los sobrenadantes y determine el porcentaje de hemólisis para cada uno deellos, empleando el tubo control (sangre + agua destilada) como el 100 % de hemólisis.

* Marque los 11 tubos de prueba y repartir así:
Tubos N° | Sol. ClNa 0.75% (ml) | Agua Destilada (ml) |...
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