Jahi

SEMINARIO SEMANA Nº 13

TÉCNICAS EN BIOLOGÍA MOLECULAR, APLICACIÓN EN MEDICINA

1.Explique la técnica PCR (Reacción en cadena de polimerasa). Aplicaciones en medicina. EVELYN

2. Explique la técnica de ELISA (Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay) directo y sus aplicaciones en medicina. KHRISSELL

Fundamentos y Tipos de ELISAs.
El ELISA se basa e el uso de antígenos o anticuerpos marcadoscon una enzima, de forma que los conjugados resultantes tengan actividad
tanto inmunológica como enzimática. Al estar uno de los componentes (antígeno o anticuerpo) marcado con una enzima e insolubilizado sobre
un soporte (inmunoadsorbente) la reacción antígeno-anticuerpo quedará inmovilizada y, por tanto, será fácilmente revelada mediante la adición
de un substrato especifico que alactuar la enzima producirá un color observable a simple vista o cuantificable mediante el uso de un
espectrofotómetro o un colorímetro.
Los diferentes tipos de ELISA son los que se enumeran a continuación:
• Anticuerpos marcados:
8 ELISA Directo
8 ELISA Indirecto
8 ELISA sándwich
ƒ Doble (DAS)
ƒ Heterólogo (HADAS)
• Antígeno marcado
8 ELISA competitivo

ELISA Directo.
Constade las siguientes etapas:
• Fijación al soporte insoluble (“tapizado”) de antígenos específicos. Lavado para eliminar los antígenos fijados deficientemente o no fijados.
• Adición de anticuerpos marcados (“conjugados”) con una enzima; si los anticuerpos reaccionan con los antígenos, el complejo quedará
solubilizado. Lavado para eliminar los anticuerpos marcados que no hayan reaccionado.
•Adición de un substrato sobre el que sea capaz de actuar la enzima marcadora. Se puede parar la reacción si se desea.
• Lectura visual o colorimétrica del producto final coloreado.

http://www.higiene.edu.uy/parasito/trabajos/elisa.pdf

3. Explique la técnica de ELISA (Enzyme-Linked Inmuno Sorbent Assay) indirecto y sus aplicaciones en medicina. GABRIELA

4. Explique la técnica demicroarrays y sus aplicaciones en medicina. MARI

5.Marcadores celulares: proteína verde fluorescente.. KHRISSELL

Resumen |
Nuestra capacidad para revelar los detalles más ínfimos de la biología celular ha aumentado considerablemente gracias al descubrimiento y avance de diversas técnicas de visualización. Entre ellas destaca el uso de las proteínas fluorescentes. En esta revisión describimosalgunas propiedades generales de las proteínas fluorescentes que son esenciales para sus funciones. También proporcionamos una visión general de las aplicaciones de estas proteínas para aumentar el conocimiento sobre el metabolismo y la biología celular. |
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Introducción |
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Principio del formularioFinal delformulario-------------------------------------------------
Principio del formularioFinal del formularioINSERTAR EN WEB   AMPLIAR  DESCARGARMicrografía de fluorescencia mostrando células de mamífero expresando la proteína verde fluorescente en su citoplasma.La proteína verde fluorescente original (GFP; del inglés Green Fluorescent Protein) fue descubierta en los años 60 por investigadores que estudiaban las propiedadesbioluminiscentes de la medusa Aequorea victoria. Sus estudios dieron como resultado el aislamiento de una proteína bioluminiscente llamada aequorina, junto con otra proteína, que pasó a llamarse GFP. Estas dos proteínas trabajan juntas en los órganos de la medusa para convertir las señales luminiscentes inducidas por Ca2+ en la luminiscencia verde característica de esta especie.
La GFP es una proteínamonomérica de unos 230 aminoácidos que forma una estructura terciaria conocida como barril beta, común en muchas otras proteínas florescentes caracterizadas posteriormente. En esta proteína, el barril beta está formado por 11 cadenas. Pero lo realmente interesante de esta estructura es que además incluye una hélice alfa central que atraviesa el barril en toda su longitud. En esta hélice está el...