Katherine

La coloración de Papanicolaou es la técnica por excelencia de la citología general como la hematoxilina eosina lo es para el método histológico. Les presento aquí la técnica original completa y las variaciones prácticas y cotidianas así como otras recetas prácticas que espero les resulten útiles
Para lograr una buena preparación citológica es necesario que el la toma o recolección del materialsea adecuada, una correcta y rápida fijación, y un buen proceso de coloración.
Para la Coloración de Papanicolaou es necesario que los preparados sean previamente fijados en alcohol 96º. El material extendido en el portaobjeto debe fijarse inmediatamente antes que comience la desecación. Lo ideal es sumergirlo en alcohol 96º no menos de 10 minutos.
Aerosoles:
Hay fijadores para uso enlaboratorio y se utilizan también los fijadores para el cabello en aerosol (spray). Si se utilizan estos últimos es aconsejable optar entre las marcas más económicas porque tienen más alcohol y menos laca.
Se rocía el extendido en forma uniforme durante algunos segundos a una distancia no menor a 15 – 20 cm. Los preparados se secan bastante rápidamente pero si se los envuelve en papel antes que se sequense suele adherir las fibras de celulosa del papel.
Los preparados fijados de esta manera pueden conservarse hasta dos semanas antes de colorear y esto hace posible la remisión a distancia en caso de no contarse con un laboratorio próximo.
¿Cómo recuperar la muestra cuando el material se dejó secar al aire?
El extendido puede re – hidratarse siempre y cuando no haya habido fijación previa.Rehidratación:
Procedimiento:
Colocar la muestra de 3 a 5 minutos en una solución a/a (por partes iguales) de agua destilada y glicerina.
Ejemplo 50 ml de agua destilada y 50 ml de glicerina. (3 – 5 minutos)
A continuación escurrir y fijar en alcohol 96º o spray fijador.
El agua hidrata y la glicerina devuelve elasticidad a las células.
¡De no contar con estos elementos!…
Sumergir la muestrapara la hidratación directamente en agua corriente durante 3 – 5 minutos y fijar con alcohol 96º o spray. Luego colorear como de costumbre.
Coloración de Papanicolaou:
El Método de Tinción según Papanicolaou es de gran nobleza y ha tolerado infinidad de variaciones resultantes en productos de buena calidad, aptos para la observación microscópica minuciosa que requiere la citología.
Es un métodode coloración muy refinado, científicamente probado y comprobado que requiere en su fórmula original una gran cantidad de pasos y da un producto de absoluta sutileza de colores y transparencia.
Método Original de Coloración de Papanicolaou:
1. Alcohol etílico 96º 15 Seg.
2. Alcohol etílico 70º 15 Seg.
3. Alcohol etílico 50º 15 Seg.
4. Agua Destilada 15 Seg.
5. Hematoxilina de Harris 6 Min.6. Agua destilada 10 inmersiones.
7. Sol ácido clorhídrico 0,5% 1 – 2 inmersiones rápidas.
8. Agua destilada 15 Seg.
9. Sol Amoníaco 1,5% en ol 70º La extensión vira al azul.
10. Alcohol etílico 50º 15 Seg.
11. Alcohol etílico 70º 15 Seg.
12. Alcohol etílico 96º 15 Seg.
13. O G 6 (orange) 2 Min.
14. Alcohol etílico 96º 10 inmersiones.
15. Alcohol etílico 96º 10 inmersiones.
16. EA 50 (36)Eosina amarillenta) 3 Min. (Usar EA 65 para orinas y esputos)
17. Alcohol etílico 96º (10 inmersiones)
18. Alcohol etílico 100º (10 inmersiones)
19. Xilol (10 inmersiones)
20. Montaje: Con Bálsamo de Canadá y cubrir con cubreobjetos de vidrio de la medida adecuada para cobertura total de la muestra.
Cubreobjetos:
Los cubreobjetos de las muestras cérvico vaginales, no deben ser menoers a 24x 50mm. Tamaños menores indican la escasez de la muestra. En el Hospital Nac. Prof. Dr. A. Posadas las muestras ginecológicas se cubren con cubreobjetos de 24 x 60mm
Recomendación:
Es muy importante respetar el tiempo de la Hematoxilina. La sobrecoloración de los núcleos produce hipercromasia y puede ser causa de interpretación errónea de alteraciones nucleares y sobrediagnóstico.
Los tiempos...