kendahl
Páginas: 5 (1244 palabras)
Publicado: 4 de abril de 2013
PRINCIPIO DEL METODO KJELDAHL
El Método desarrollado por Kjeldahl consta de tres etapas:
1.
Digestión: conversión del Nitrógeno (proveniente de las proteínas, por ejemplo) en ion amonio.
2.
Destilación: separación por arrastre con vapor del amoníaco y posterior solubilización en una solución ácida de concentración conocida.
3.
Valoración: medición de la cantidad de ácido neutralizadopor el amoníaco disuelto, lo que indica la cantidad de Nitrógeno presente en la muestra inicial.
De acuerdo al origen de la muestra, a través de un factor se relaciona la cantidad de Nitrógeno encontrado con el porcentaje de proteínas que lo originaron.
1. DIGESTIÓN
La muestra a analizar ,cuyo contenido de proteínas es desconocido, es atacada por una mezcla de Acido Sulfúrico alque se le añade una mezcla de una sal ( Sulfato de Potasio o de Sodio ) conteniendo una pequeña proporción de un catalizador. En la actualidad, el más ampliamente usado es Sulfato de Cobre, por no ser tóxico y resultar inocuo para el medio ambiente.
El agregado de la sal mezclada con el catalizador provoca que la temperatura durante la digestión se eleve e incremente la velocidad de rupturade los enlaces moleculares, facilitando la completa conversión del Nitrógeno proteico en ion Amonio.
La técnica consiste entonces en colocar la muestra en el tubo de reacción , añadir el ácido junto con la mezcla de la sal y el catalizador. Se procede entonces a incrementar la temperatura mediante la calefacción directa del tubo que contiene a toda la mezcla, hasta alcanzar los 370*C; unavez alcanzada esa temperatura se la mantiene hasta lograr la completa digestión de la muestra.
Entre los modelos existentes en el mercado, la firma BUCHI de Suiza provee digestores identificados como modelos K-424 y K435 que permiten la operación simultánea de 6 o 12 tubos, mediante calefacción por radiación infrarroja logrando un calentamiento rápido hasta alcanzar la temperatura máxima deoperación.
En el caso de ser necesaria la digestión simultánea de más muestras, se podrá optar por el modelo K-370, que calefacciona mediante block de Aluminio hasta 20 tubos.
Este modelo permite además la programación del proceso de calefacción a contraturno, lo que permitiría contar con las muestras ya digeridas en el momento de comenzar la jornada laboral.
Es importante destacarque en esta etapa se hace necesario eliminar los gases sulfurosos provenientes de la digestión de cada uno de los tubos.
Para ello se crea una leve corriente de aspiración mediante vacío, colectando y solubilizando los gases en una solución alcalina, que evita la contaminación de la atmósfera en el ámbito laboral. También aquí podemos recurrir a BUCHI, que nos ofrece una solución práctica,mediante el disolutor de gases modelo B-414, que elimina toda posible contaminación.
El uso de los tubos de digestión BUCHI tiene como ventajas: su gruesa pared de vidrio resistente al trabajo con ácido y álcalis concentrados y calientes, posee una junta hermética en la boca que evitará la pérdida de gases y el angostamiento que tienen evita salpicaduras con la consiguiente pérdida de muestra yreactivos; su diámetro de 48 mm evita que se formen altas columnas de espuma , siendo su volumen de 300 ml adecuado para la operación con muestras de baja densidad y gran volumen.
Para una muestra de 1 gramo, es necesario añadir 20 ml de Ácido Sulfúrico, 9,500 gramos de Sulfato de Potasio y 0,500 gramos de Sulfato de Cobre.
Para esta proporción la operación se prolonga durante 90minutos o hasta 30 minutos luego de que la mezcla digerida haya tomado una coloración verde azulada.
El control de la temperatura es muy importante, ya que una temperatura inferior a la citada provoca una digestión incompleta mientras que una temperatura mayor provocará pérdida de compuestos nitrogenados en la corriente de gases que salen de los tubos; en ambos casos, los resultados finales...
El Método desarrollado por Kjeldahl consta de tres etapas:
1.
Digestión: conversión del Nitrógeno (proveniente de las proteínas, por ejemplo) en ion amonio.
2.
Destilación: separación por arrastre con vapor del amoníaco y posterior solubilización en una solución ácida de concentración conocida.
3.
Valoración: medición de la cantidad de ácido neutralizadopor el amoníaco disuelto, lo que indica la cantidad de Nitrógeno presente en la muestra inicial.
De acuerdo al origen de la muestra, a través de un factor se relaciona la cantidad de Nitrógeno encontrado con el porcentaje de proteínas que lo originaron.
1. DIGESTIÓN
La muestra a analizar ,cuyo contenido de proteínas es desconocido, es atacada por una mezcla de Acido Sulfúrico alque se le añade una mezcla de una sal ( Sulfato de Potasio o de Sodio ) conteniendo una pequeña proporción de un catalizador. En la actualidad, el más ampliamente usado es Sulfato de Cobre, por no ser tóxico y resultar inocuo para el medio ambiente.
El agregado de la sal mezclada con el catalizador provoca que la temperatura durante la digestión se eleve e incremente la velocidad de rupturade los enlaces moleculares, facilitando la completa conversión del Nitrógeno proteico en ion Amonio.
La técnica consiste entonces en colocar la muestra en el tubo de reacción , añadir el ácido junto con la mezcla de la sal y el catalizador. Se procede entonces a incrementar la temperatura mediante la calefacción directa del tubo que contiene a toda la mezcla, hasta alcanzar los 370*C; unavez alcanzada esa temperatura se la mantiene hasta lograr la completa digestión de la muestra.
Entre los modelos existentes en el mercado, la firma BUCHI de Suiza provee digestores identificados como modelos K-424 y K435 que permiten la operación simultánea de 6 o 12 tubos, mediante calefacción por radiación infrarroja logrando un calentamiento rápido hasta alcanzar la temperatura máxima deoperación.
En el caso de ser necesaria la digestión simultánea de más muestras, se podrá optar por el modelo K-370, que calefacciona mediante block de Aluminio hasta 20 tubos.
Este modelo permite además la programación del proceso de calefacción a contraturno, lo que permitiría contar con las muestras ya digeridas en el momento de comenzar la jornada laboral.
Es importante destacarque en esta etapa se hace necesario eliminar los gases sulfurosos provenientes de la digestión de cada uno de los tubos.
Para ello se crea una leve corriente de aspiración mediante vacío, colectando y solubilizando los gases en una solución alcalina, que evita la contaminación de la atmósfera en el ámbito laboral. También aquí podemos recurrir a BUCHI, que nos ofrece una solución práctica,mediante el disolutor de gases modelo B-414, que elimina toda posible contaminación.
El uso de los tubos de digestión BUCHI tiene como ventajas: su gruesa pared de vidrio resistente al trabajo con ácido y álcalis concentrados y calientes, posee una junta hermética en la boca que evitará la pérdida de gases y el angostamiento que tienen evita salpicaduras con la consiguiente pérdida de muestra yreactivos; su diámetro de 48 mm evita que se formen altas columnas de espuma , siendo su volumen de 300 ml adecuado para la operación con muestras de baja densidad y gran volumen.
Para una muestra de 1 gramo, es necesario añadir 20 ml de Ácido Sulfúrico, 9,500 gramos de Sulfato de Potasio y 0,500 gramos de Sulfato de Cobre.
Para esta proporción la operación se prolonga durante 90minutos o hasta 30 minutos luego de que la mezcla digerida haya tomado una coloración verde azulada.
El control de la temperatura es muy importante, ya que una temperatura inferior a la citada provoca una digestión incompleta mientras que una temperatura mayor provocará pérdida de compuestos nitrogenados en la corriente de gases que salen de los tubos; en ambos casos, los resultados finales...
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