La detecci n por transcripci n inversa

2002
Virus de la hepatitis E (VHE) es un importante problema de salud pública en muchos países en desarrollo. HEV es también
endémica en algunos condados industrializados, incluido Estados Unidos. Con nuestro reciente descubrimiento de HEV porcina
en los cerdos que se genéticamente muy relacionados con VHE humano, la hepatitis E se considera una enfermedad zoonótica.
Cepas Humanos de HEV songenéticamente heterogénea. Hasta ahora, en los Estados Unidos, sólo una cepa del VHE porcina
se ha identificado y caracterizado a partir de un cerdo. Para determinar la extensión de variaciones genéticas y la naturaleza
de infecciones HEV porcina en cerdos de Estados Unidos, hemos desarrollado una transcripción-PCR (RT-PCR) inverso universal que
es capaz de detectar cepas genéticamente divergentes deHEV. Mediante el uso de este ensayo de RT-PCR universal, hemos probado
muestras de heces y suero de cerdos de 2 a 4 meses de edad de 37 diferentes granjas de cerdos de Estados Unidos para la presencia de
porcina HEV RNA. Treinta y cuatro de los 96 cerdos (35%) y 20 de los 37 rebaños de cerdos (54%) probados fueron positivos para
porcina HEV RNA. Las secuencias de una región de 348 pb en el genORF2 del HEV 27 porcina aislados de
Se determinaron las diferentes regiones geográficas. Los análisis de la secuencia reveló que los 27 estadounidenses aislados HEV porcina
compartida 88-100 identidades de secuencia% de nucleótidos entre sí y 89-98% de identidades con el prototipo
EEUU cepa de VHE porcino. Estos estadounidenses aislados HEV porcina están sólo lejanamente relacionadas con las cepas deTaiwán de
porcina HEV, con cerca de 74 a 78% identidades de secuencias de nucleótidos; a las cepas humanas más conocidos de HEV
en todo el mundo, con <79% secuencia de identidades; y para VHE aviar, con 54 a 56% secuencia de identidades. Filogenético
análisis mostró que todo el HEV porcina estadounidense aislados identificados en este estudio agrupado en el mismo genotipo con
el prototipo HEVporcina Estados Unidos y las dos cepas estadounidenses de HEV humano. Los datos de este estudio indicaron que
HEV porcina es generalizada y enzoóticas en los Estados Unidos piaras y que, al igual que con el VHE, HEV porcina humana
aislados de diferentes regiones geográficas del mundo también son genéticamente heterogénea. Estos datos plantean más
posibles problemas de zoonosis, xenozoonosis, y laseguridad alimentaria.

Hepatitis E es una enfermedad muy importante en muchos países en desarrollo
países y también es endémica en algunos países industrializados,
incluyendo los Estados Unidos (1, 26, 31, 33). El Primarschule enfermedad
ily afecta a adultos jóvenes y se dice que tiene una tasa de mortalidad de
hasta un 25% en las mujeres embarazadas (8, 12, 31). Virus de la hepatitis E
(HEV), elagente causante de la hepatitis E, es principalmente trans-
presentado por la ruta fecal-oral a través del agua contaminada o
el abastecimiento de agua (1, 31). HEV es un sentido positivo, de un solo filamento
Virus ARN sin un sobre. El virus permanece sin Clasificar
cado, a pesar de que una vez fue clasificado en la familia Caliciviridae
(13, 30). El genoma del VHE es de aproximadamente 7,5 kb ycontiene tres marcos de lectura abierta y un corto de 5 y 3
región no traducida. ORF1 es el más grande de los tres abiertos
marcos de lectura y codifica proteínas no estructurales, ORF2 en-
códigos de la proteína de la cápside putativo, y ORF3 codifica una pequeña
proteína de función desconocida (1, 11, 17, 20, 31, 38, 44). En el
Estados Unidos, los casos esporádicos de hepatitis E aguda enpacientes
sin exposición epidemiológica conocido han sido reportados
(4, 32). Los anticuerpos anti-HEV se han detectado en una significativa
proporción peralte de individuos sanos en los Estados Unidos (19,
25, 28, 36). La existencia de un reservorio animal para HEV tiene
ha propuesto (25-27).
HEV porcina, la primera cepa de animales de VHE, se identificó
y caracterizado en 1997 de un cerdo en los...