La vida Cx

Diagnóstico Microbiológico
Introducción
Diagnóstico etiológico
Guiar terapia ATB
Información epidemiológica
Información enfermedades infecciosas transmisibles
Información sobre IAAS
Optimización estudio microbiológico





1. Toma de Muestra

Tipo de muestra
Sitio de muestra
Tiempo desde la toma de muestra
Medio de transporte
Conservación adecuada de la muestra
Conocimiento“Manual Toma de Muestras”
Verificar si cumplen indicaciones en la toma
Conocer criterios de aceptación y rechazo de las muestras

La confiabilidad e interpretación de los resultados del estudio microbiológico dependen de la calidad de la toma de muestra

2. Requisitos Básicos

Representatividad del sitio de la infección
Técnica aséptica
Cantidad adecuada
Líquidos: 2ml
Tejido: 0,5 gAntes del inicio de ATB (Idealmente)
Fase aguda de la enfermedad
Transporte tiempo requerido (< 2 horas), si no es posible tomar las medidas para conservar la viabilidad de la muestra
Correcta identificación (orden y envase)

3. Solicitud Examen Microbiológico

Datos del paciente
Procedencia
Diagnóstico de sospecha
Tipo de muestra
Examen solicitado
Información adicional
Hemocultivos:Hora de la muestra – T° - Identificación operador

4. Criterios de rechazo de la muestra

Datos incompletos o ilegibles
Discordancia datos de la solicitud y contenedor de la muestra
Transporte inadecuado
Cultivo anaerobios sin medio de transporte
Orina > 1 hora a T° ambiente
Contenedor sucio, no estéril, quebrado o inadecuado
Derrame o contaminación externa visible
Muestras que NOcumples con estándares establecidos por el laboratorio

Métodos para el diagnóstico de Agentes Infeccioso
1. Tinciones


Tinción

Utilidad
Gram
Clasificación bacterias Gram (+) y (-)
Ziehl Neelsen
Micobacterias – Cryptosporidium
Giemsa
Plasmodium sp. – Pneumocystis sp.
Naranja de acridina
(ADN bacteriano)
Bacteria Gram lábiles
Detecta sólo presencia de bacterias.
Blanco deCalcofluor
Hongos (Levaduras y Filamentos)
Tinción de toluidina
Pneumocystis jirovecci
Tinción de esporas
Esporas de bacilos Gram (+)
Tinción de cápsula
(Tinta China)
Cryptococcus sp.

Tinción Gram

Afinidad tintorial de las bacterias
Permite conocer forma y disposición bacteriana
Observar levaduras yemantes o formando pseudohifas
Bajo costo y gran utilidad
Orientación diagnóstica rápidaDiagnostico etiológico
Sensibilidad Analítica: Cantidad mínima de MO 100.000/ml de muestra
Sensibilidad Clínica:
LCR (75%)
Líquido pleural (50 – 80%)
Líquido peritoneal (25 – 50%)
Liquido articular (50%)
Orina: Buena correlación con urocultivo (+)

2. Cultivos

Desarrollo in vitro de MO mediante su inoculación en medio que posee factores nutritivos – ambientales que permitandesarrollo.

Agente etiológico
Identificación agente vivo activo
Identificación género y especie
Estudio de susceptibilidad
Requiere MO vivos que puedan desarrollarse
Máximo rendimiento: Siembra + Cultivo lo más pronto posible luego de la toma de muestra y antes del uso de ATB
Depende de la calidad de muestra obtenida

3. Detección de Ag y Productos

Detecta MO NO viables
Estudio MOdifícil desarrollo
Monitorización concentración Ag
Métodos: IF – ELISA – Inmunoperoxidasa
Ag: Bacterianos – Virales – Fúngicos

4. Serología

Ac en fluidos
Diagnóstico Indirecto: Estudio respuesta inmune humoral
Diagnóstico Presunto
Determinación IgM: Diagnostico Infección Aguda
Determinación IgG: Contacto con MO – Seroconversión o ascenso de títulos en 4 diluciones (Infección Aguda)Métodos: ELISA – Fijación Complemento – IF – Aglutinación Látex – Radioinmunoensayo
Pro: Rapidez – Facilidad obtención de muestra – Bajo costo
Contra: Reacciones Cruzadas – Falsos Negativos ID



5. Biología Molecular

Detección material genético MO
Alta S – E
PCR Tiempo Real / Convencional
Hibridación
Indicaciones:
MO Crecimiento lento
MO NO cultivables
MO Fastidiosos
Factores de...