La vida humana

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES
LABORATORIO BIOQUÍMICA
Alumno: ___________________________________________ Código: _________________
Alumno: ___________________________________________ Código: _________________

Práctica 9: ESTUDIO CINETICO DEL ENZIMA ALFA – AMILASA:
EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN, EL pH Y LA TEMPERATURA SOBRE LA VELOCIDAD DE UNA
REACCIÓN ENZIMÁTICA.

OBJETIVOS:
•Reconocer y diferenciar los factores que afectan la velocidad de las reacciones catalizadas por
enzimas.

•

Ilustrar el mecanismo por el cual ciertos factores afectan la velocidad de las reacciones
enzimáticas.

•

Utilizar aquellos factores que afectan la velocidad de las reacciones enzimáticas para comprender
cómo se regula el trabajo de las enzimas en los organismos biológicos.

•Discutir los efectos de las variaciones bruscas de factores como temperatura y pH en el
funcionamiento adecuado de los organismos.

1. FUNDAMENTO TEÓRICO
Estudio cinético del enzima α-amilasa.
Introducción a la enzimología.
La cinética enzimática tiene por objeto el estudio de la velocidad de las reacciones catalizadas
por enzimas, así como los factores que en ella influyen y los mecanismospor los cuales
transcurren las reacciones enzimáticas. La velocidad de las reacciones enzimáticas se puede
medir:
1

Por la cantidad de sustrato que desaparece por unidad de tiempo.

2

Por la cantidad de producto que aparece por unidad de tiempo.

En esta práctica de laboratorio se comprobará la influencia de la concentración del sustrato [S],
del enzima [E], el pH y la temperatura(T°C) sobre la velocidad de la reacción catalizada por el
enzima α-amilasa salival, sobre los enlaces α-1,4 del almidón.

Para ello nos basaremos en la desaparición del almidón por unidad de tiempo, mediante el
seguimiento de la reacción de coloreada que produce el mismo, así como sus productos de
hidrólisis, con el Iodo en disolución de Ioduro de potasio (Reactivo de Lugol).
Dado que el almidónestá integrado por dos fracciones, la amilosa y la amilopectina, debe
tenerse en cuenta las reacciones que ambas producen (así como sus respectivos productos de
hidrólisis) con el reactivo de Lugol.
Basándonos en las reacciones anteriores podemos estudiar el efecto que provocan en la
cinética enzimática la variación de los factores que en ella influyen: [S], [E], pH y T°C,
fundamentalmente.2. SEGURIDAD DURANTE LA PRÁCTICA

2.1 Normas de seguridad
El estudiante debe referirse al manual de normas de seguridad.
2.2 Equipos de protección personal
Usar durante todo el desarrollo de la práctica los siguientes elementos de seguridad:
•

Bata de laboratorio

•

Guantes de nitrilo

•

Gafas de seguridad

Mantener los elementos personales de seguridad identificados y enbuen estado. Está prohibido su
intercambio con los demás compañeros de laboratorio.
2.3 Manejo de Residuos químicos

Tanto por razones de seguridad como por respeto al medio ambiente, es importante disponer los
residuos generados en las prácticas del laboratorio de química en forma adecuada. Por ello el
estudiante debe:
1.

Emplear los recipientes destinados para eliminar los residuos odesechos de laboratorio, los
cuales están debidamente identificados según el tipo de sustancia a desechar.

2.

Verter únicamente los residuos en el recipiente correspondiente para evitar reacciones no
controladas y potencialmente peligrosas.

No arrojar por el desagüe los desechos o residuos químicos obtenidos durante el desarrollo de la
práctica. Si tiene alguna inquietud al respectocomuníquela al responsable del laboratorio, quien le
indicará la forma correcta de hacerlo.

3. TRABAJO INTEGRADO DE LABORATORIO
CONSULTAS PREVIAS.
1

¿Cuáles son las características estructurales del almidón?

2

¿Qué tipo de enzima es la α-amilasa salival?

3

¿Cuáles son los productos que origina la acción de este enzima sobre el almidón?

4

Explique cómo influyen en la...