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Transferencia de energía de resonancia de Förster
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Transmisión de energía de resonancia o transferencia de energía de resonancia de Förster, habitualmente abreviado como FRET por sus siglos en idioma inglés Förster resonance energy transfer, es un mecanismo de transferencia de energía entre cromóforos. Se basa en que laexcitación de un cromóforo puede transferirse a otro cercano, generalmente cuando ambos se sitúan en la misma molécula, mediante un mecanismo acoplador dipolo-dipolo. Fue descrita por el científico alemán Theodor Förster en 1914.[1] En el caso de que los cromóforos sean fluorescentes (esto es, fluorocromos), el mecanismo subyacente continúa siendo el mismo: la energía se transfiere, lo que desemboca enla aparición de fluorescencia (cabe destacar que no es la fluorescencia la transferida)[2] [3]
Las aspectos del FRET son:[4]
1. Es precisa una gran cercanía entre los cromóforos o fluorocromos, en torno a 10-100 Å.
2. El espectro de absorción del cromóforo aceptor debe superponerse el espectro de emisión de fluorescencia del donador.
3. De extinguir la fluorescencia del fluorocromo aceptador(«fotobleaching»), aumenta la intensidad de la emisión del fluorocromo donador. Esto se debe a la inhibición del FRET debido a que, por excitación de gran intensidad, el aceptor ya es incapaz de absorber fotones; al excitar el flurocromo donador, la intensidad producida por éste aumenta puesto que no pierde energía por transferencia al aceptor, ya bloqueado.


LABORATORIOS DE  MICROFOTONICA
 TRANSFERENCIA DE ENERGIA ENTRE FLUOROCROMOS
La transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET), también llamada transferencia lineal de energía (en inglés, fluorescence resonance energy transfer) es una interacción que ocurre solo a muy corta distancia entre dos estados de excitación electrónica de dos moléculas fluorescentes en la que la longitud de onda de emisión de una deellas coincide con la de excitación de la otra.

La FRET es inversamente proporcional a la sexta potencia de la distancia entre los dos fluorocromos por lo que solo puede producirse cuando están muy próximos.
En el ejemplo de la figura, la Blue fluorescent protein (donador) se excitaría con un fotón ultravioleta y emitiría en el rango del azul, mientras que la green fluorescent proteín (aceptor) seexcitaría con los fotones azules emitidos por la BFP y emitiría fotones verdes. Por si solos los fotones ultravioletas serían incapaces de conseguir la emisión de fotones verdes de la GFP por lo que la emisión de estos solo podría realizarse si ha habido FRET.
La FRET es una técnica importante para investigar una gran variedad de fenómenos biológicos que implican la proximidad entre dosmoléculas.
Condiciones necesarias para el FRET
1. Las moléculas de aceptor y donante deben estar muy próximas (10-100 Å).
2. El espectro de absorción del aceptador debe sobreponer el espectro de emisión de fluorescencia del donante.(ver figura).
3. Si extinguimos la fluorescencia del fluorocromo aceptador (fotobleaching)  aumenta la intensidad de la emisi�n del fluorocromo donador. Lo que hacemos esdestruir la FRET excitando fuertemente con el laser adecuado (488 nm para GFP) con lo que el aceptador ya es incapaz de absorber fotones, al excitar al fluorocromo donador (BFP con 350 nm) la intensidad de emisi�n de �ste �ltimo AUMENTA respecto a cuando se produc�a FRET porque los fotones que emite ya no son absorbidos por el aceptador.

FRET | Transferencia de Energía de Resonancia Förster(Fluorescente)
                                                                                           
PALABRAS CLAVE: Fluorescencia, GFP, fluoróforos, imagen de células vivas, FLIM, confocal, imagen espectral
 
DEFINICIÓN:
El FRET es una técnica fluorescente que permite la investigación de las interacciones moleculares. Esta depende de la transferencia de energía de un fluoróforo a...