Lab 1- Espectro

Laboratorio Bioquímica: Espectrofotometría de absorción molecular.

Objetivo: Comprender los principios de la absorción molecular de la luz visible y valorar su uso en el análisis cuantitativo.Introducción

Todas las moléculas y átomos son capaces de absorber radiación electromagnética, lo que nos permite, por ejemplo, sentir el calor de una estufa encendida. Pero no fue hasta que sedescribió la Ley de Lambert y Beer que esta propiedad alcanzó una forma práctica, La Ley de Lambert y Beer dice:

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Donde el logaritmo decimal de la razón entre la luz monocromática incidente I0a una muestra con respecto a la luz transmitida I (esta razón la llamaremos de ahora en adelante Absorbancia) es directamente proporcional a un coeficiente de extinción molar ε, la longitud del pasode la luz por la muestra d, y la concentración del compuesto que absorbe la radiación en la muestra c. Esto se ejemplifica en la siguiente figura:

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La mayoría de los métodos para elanálisis de los componentes de la sangre y otros líquidos biológicos se basan en la generación de una solución y la comparación entre la luz que absorbe la solución problema con la que absorbe unasolución de concentración conocida. Los métodos son simples, rápidos y sensibles y hacen posible la estimación de pequeñas cantidades de sustancias muy difíciles de medir por otros métodos.
Losespectrofotómetros son instrumentos para medir la luz que llega a un detector fotoeléctrico, llamado fotomultiplicador, traduciéndola en una señal eléctrica que luego es procesada por el equipo para elcálculo de la concentración del material absorbente de la luz.


Los espectrofotómetros constan en esencia de las siguientes partes:


• Una fuente luminosa que es variable según lazona del espectro electromagnético que desee utilizarse, principalmente las lámparas de mercurio para la luz UV, y de tungsteno para la luz visible.
• Un dispositivo colimador para alinear los...