lab 1
Páginas: 3 (649 palabras)
Publicado: 4 de mayo de 2014
INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
CQU-310
Cuantificación de Proteínas
Método de Lowry
OBJETIVOS
1. Determinarespectrofotometricamente la concentración de Albúmina, utilizando método de Lowry.
2. Realizar cálculos matemáticos para obtener parcialmente la concentración de proteínas trabajadas.
3. Graficar datos obtenidos delespectrofotómetro, para obtener finalmente la concentración de nuestra muestra problema.
4. Desnaturalizar la proteína BSA
MATERIALES Y MÉTODOS
1. BSA 0.4 mg/ml.
2. 7 tubos de ensayos rotulados3. Pro pipetas y pipetas (1.0 ml y 5.0 ml )
4. Gradilla
5. Vasos precipitados
6. Espectrofotómetro
7. Horno a 55º C
8. Agua
9. Solución de proteína Albumina de suero de Bovino (SBA) 0.4mg/ml10. Reactivo de cobre alcalino (RCA) Na2CO3 10% -tartrato de Na y K 0.1% - CuSO4 0.05%NaOH 0.5N
11. Reactivo de Folin-ciocalteau
Cantidades
N° del Tubo
Volumen de BSA 0,4 mg/ml (ml)
Volumen deH2O (ml)
Volumen de R.C.A (ml)
Volumen de R.F. (ml)
0 Blanco
----
1,0
1,0
4,0
1
0,1
0,9
1,0
4,0
2
0,2
0,8
1,0
4,0
3
0,3
0,7
1,0
4,04
0,4
0,6
1,0
4,0
5
0,5
0,5
1,0
4,0
6 M.P
0,5
0,5
1,0
4,0
R.C.A. (reactivo de cobre alcalino). Na2CO3 10% - Tartrato de Nay K 0,1% -CuSO4 0,05% - NaOH 0,5N
R.F. (reactivo Folín).
METODO A UTILIZAR
El método que utilizamos en nuestro experimento es el “método de lowry”. El cual es un método colométricopara determinar la concentración cuantitativa de las proteínas, que está basado en la asociación de dos reacciones complementarias:
1.-Reacción previa de la proteína en medio alcalino con ionesCu2+, en presencia de tartrato para evitar la precipitación. Es esencialmente idéntica a la reacción del Biuret, formándose un complejo de coordinación entre el cobre y el nitrógeno peptídico....
INFORME DE LABORATORIO DE BIOQUIMICA
CQU-310
Cuantificación de Proteínas
Método de Lowry
OBJETIVOS
1. Determinarespectrofotometricamente la concentración de Albúmina, utilizando método de Lowry.
2. Realizar cálculos matemáticos para obtener parcialmente la concentración de proteínas trabajadas.
3. Graficar datos obtenidos delespectrofotómetro, para obtener finalmente la concentración de nuestra muestra problema.
4. Desnaturalizar la proteína BSA
MATERIALES Y MÉTODOS
1. BSA 0.4 mg/ml.
2. 7 tubos de ensayos rotulados3. Pro pipetas y pipetas (1.0 ml y 5.0 ml )
4. Gradilla
5. Vasos precipitados
6. Espectrofotómetro
7. Horno a 55º C
8. Agua
9. Solución de proteína Albumina de suero de Bovino (SBA) 0.4mg/ml10. Reactivo de cobre alcalino (RCA) Na2CO3 10% -tartrato de Na y K 0.1% - CuSO4 0.05%NaOH 0.5N
11. Reactivo de Folin-ciocalteau
Cantidades
N° del Tubo
Volumen de BSA 0,4 mg/ml (ml)
Volumen deH2O (ml)
Volumen de R.C.A (ml)
Volumen de R.F. (ml)
0 Blanco
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1,0
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6 M.P
0,5
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R.C.A. (reactivo de cobre alcalino). Na2CO3 10% - Tartrato de Nay K 0,1% -CuSO4 0,05% - NaOH 0,5N
R.F. (reactivo Folín).
METODO A UTILIZAR
El método que utilizamos en nuestro experimento es el “método de lowry”. El cual es un método colométricopara determinar la concentración cuantitativa de las proteínas, que está basado en la asociación de dos reacciones complementarias:
1.-Reacción previa de la proteína en medio alcalino con ionesCu2+, en presencia de tartrato para evitar la precipitación. Es esencialmente idéntica a la reacción del Biuret, formándose un complejo de coordinación entre el cobre y el nitrógeno peptídico....
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