lab 5 de biologia unab







UNIVERSIDAD ANDRÉS BELLO
FACULTAD DE ECOLOGIA Y RECURSOS NATURALES
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS BIOLÓGICAS
LABORATORIO DE BIOLOGÍA CELULAR









TRABAJO PRÁCTICO N°5:
ORGANIZACIÓN SUBCELULAR
BIO-131
SECCION 8












PROFESORES: Cristian MadridMaría José Díaz


AUTORES: ABBDEL GONZALEZ
DENNISJOFRE

-2013-

Introduccion
Las primeras células eran relativamente simples y pequeñas, similares a los organismos que actualmente conocemos como procariontes. Con el pasar del tiempo ya la evolución de este organismo aparecieron las células eucariontes, másgrandes y de organización más compleja, que hoy forman parte de animales y plantas.

A diferencia de las células procariontes, las células eucariontes poseen un núcleo que contiene la mayoría del ADN el cual se encuentra envuelto en una membrana. Esto deja al material genético en un compartimento separado del resto de los contenidos de la célula contenidos en el citoplasma, donde ocurren lasreacciones metabólicas.

En el citoplasma se pueden distinguir distintos organelos: cloroplastos, mitocondrias, retículo endoplásmico, aparato de Golgi, ribosomas, peroxisomas, lisosomas, citoesqueleto, los cuales poseen diversas enzimas que cumplen funciones específicas dentro de una célula.
Cada uno de estos organelos gracias a sus características y distintos métodos contribuyen con elfuncionamiento de la celula como por ejemplo la mitocondria le provee energía , el peroxisoma detoxifica a la celula, ribosomas participa en tradunccion del RNA mensajero y citoesqueleto le da forma, movimiento y ubica los organelos en el citosol.

Para llegar a tratar con estos organelos existen distintos métodos pero el que trataremos en este practico es el fraccionamiento Subcelular es una técnicautilizada que permite obtener los componentes celulares aislados, en grandes cantidades y con un alto grado de pureza. Esta técnica consiste en la separación de los componentes de la célula basándose en su tamaño y densidad por lo que los organelos con mayor densidad y tamaño quedan en el fondo del tubo, son llamado pellet y aquellos que poseen una menor densidad con un menor tamaño quedansuspendidos en una solución de nombre.

Objetivo: Comprender el fundamento de la técnica de fraccionamiento subcelular por medio del rompimineto de la celula y la separación de los organelos mediante un campo gravitacional e identificar los componente celulares.





Materiales y Métodos

Actividad 1 : Fraccionamiento subcelular
A)Fraccionamientosubcelular de Higado
-En este experimento el profesor tomo hígado de pollo el cual lo puso en un vaso de precipitado en donde corto el hígado con tijeras y lo puso en hielo para que asi no ocurrieran reacciones en el hígado después de esto procedió a moler el hígado en la maquina de moler a 1600RPM y obtuvo el homogenizado total el cual nos entrego 5 ml de este vertido en un tubo de Falcon elcual pusimos en hielo por unos 5 minutos y luego y asi obtuvimos el homogenizado crudo después llevamos el homogenizado a la centrifuga y la profesora lo puso a 600xg por 10 minutos. Luego al retirarlo obtuvimos un sobredenante en la superficie y un pellet al fondo del tubo, asi llevamos el sobredenante a otro tubo falcon para separarlo del pellet. Luego al pellet le agregamos 1 ml de buffery lo...