Lab Anatomia e Histologia - practica5 inclusion
OBJETIVO
El objetivo de esta práctica es conocer el modo en que un tejido se procesa y se le hace inclusión con tal de que pueda estar listo para ser estudiado histológicamente. Además laorientación espacial con la que deben ser tratados.
INTRODUCCION
Nuestro fin es preparar un muy fino corte de tejido para colocar arriba de un portaobjetos y observarla en un microscopio óptico. Debeser una fina capa de tejido para que la luz del microscopio la atraviese y observemos bien los detalles. Antes de seccionar el tejido el mismo debe ser incluido en un medio rígido que me permitahacer secciones muy finas (5 a 15 µm).
El medio de inclusión utilizado en forma rutinaria es la parafina, debemos hacer que la parafina se introduzca dentro de la muestra fijada, pero la muestra hastaahora se halla en el fijador acuoso y la parafina no es soluble en agua, por lo tanto la muestra fijada debe ser deshidratada.
Después de la fijación la muestra es colocada sucesivamente enconcentraciones crecientes de alcohol. Luego de la deshidratación total en alcohol 100%, el siguiente paso es la aclaración o diafanización.
Lamentablemente la parafina no es soluble en el alcohol 100% ypor lo tanto se utiliza una sustancia intermedia (soluble en alcohol 100% y en parafina). Antes de incluir la muestra en parafina se extrae el alcohol 100% mediante el uso de xilol.
Una vez quela muestra ha sido totalmente embebida por el xilol (aclaramiento) se transfiere a un baño de parafina derretida dentro de una estufa. La estufa es mantenida a 58 grados centígrados (el punto de fusiónde la parafina es 56-57 grados) y la muestra es transferida a través de tres baños sucesivos de parafina. De esta forma la parafina caliente desplaza al xilol y difunde dentro de la muestra o tejido.A este paso se lo denomina inclusión en parafina
Luego de la inclusión en parafina se saca la muestra y se la coloca en un molde metálico donde se orienta la muestra antes de que se enfríe la...
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