lab. bacterias
El agar MacConkey es un tipo de gelatina que se produce de unas algas rojas. Este es un medio el cual se utiliza para el aislamiento de bacilos Gram negativos de fácil desarrollo, aerobios y anaerobios facultativos. Permite diferenciar bacterias que utilizan o no, lactosa en muestras clínicas, de agua y/o alimentos. Todas las especies de la familia Enterobacteriaceae sedesarrollan en el mismo.
American Public Health Association (1976) Compendium of methods for the Microbiological Examination of Foods. APHA Inc. Washington DC.
Fundamento
En el medio de cultivo, las peptonas, aportan los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. la lactosa es el hidrato de carbono fermentable, y la mezcla de sales biliares y el cristal violeta son los agentes selectivosque inhiben el desarrollo de gran parte de la flora Gram positiva.
Por fermentación de la lactosa, se disminuye el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la precipitación de las sales biliares.
Los microorganismos no fermentadores de lactosa producen colonias incoloras.
Los ingredientes necesarios paraeste medio son los siguientes:
sales biliares (medio inhóspito para el crecimiento de bacterias Gram positivas, excepto Enterococcus y algunas especies de Staphylococcus).
Violeta cristal colorante ( Inhóspito para cierto tipo de bacterias Gram-positivo).
colorante rojo neutro (el cual marca microrganismos que fermenten la lactosa).
lactosa.
peptona.
Cloruro sódico.
Luis M. De LA Maza;Pezzlo, Marie T.; Janet T. Shigei; Peterson, Ellena M. (2004). Color Atlas of Medical Bacteriology. Washington, D.C: ASM Press. pp. 103. ISBN 1-55581-206-6.
Incubación
Durante 18-48 horas, a 35-37 ºC, en atmósfera aeróbica
Resultados
Lac +: Al utilizar la lactosa en el medio, bacterias Lac+ como Escherichia coli, Enterobacter y Klebsiella producen acidez, lo cual baja el PH bajo 6,8 lo que tienecomo consecuencia la aparición de colonias de color rosadas o rojas.
Lac - : Bacterias que no fermenten la lactosa como Salmonella, Proteus y Shigella utilizaran peptona en su lugar, formando ammonio, lo cual incrementa el PH del agar, formando colonias blancas o incoloras.
Slow: Algunas bacterias en cambio fermentan la lactosa de manera lenta, y son consideradas en una categoría distinta, porejemplo: Serratia yCitrobacter.
Microorganismos
Colonias
Escherichia coli ATCC 25922
Rojas con halo turbio
Klebsiella pneumoniae ATCC 700603
Rosadas mucosas
Salmonella typhimurium ATCC 14028
Incoloras, transparentes
Shigella flexneri ATCC 12022
Incoloras, transparentes
Proteus mirabilis ATCC 43071
Incoloras, transparentes
Enterococcus faecalis ATCC 29212
Diminutas, incoloras,opacas
AGAR EMB
La eosina azul de metileno (EMB por sus siglas en inglés) .Es un medio selectivo que permite el crecimiento de bacilos gramnegativos, principalmente de la Familia Enterobacteriaceae, inhibiendo el crecimiento de las bacterias grampositivas, los indicadores eosina y azul de metileno, éstos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. Este medio combinalas fórmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. También es un medio diferencial ya que nos permite saber por la coloración de las colonias si los microorganismos que crecen fermentan lactosa o sacarosa. Esto lo realiza gracias a la eosina y el azul de metileno:La eosina es un indicador de pH y, por tanto, de la presencia de fermentación.
El azul de metileno es un compuesto que inhibe el crecimiento de bacterias Gram positivas y ciertos grupos de Gram negativas.
Siembra
En superficie, por estriado a partir de un inóculo poco denso, para obtener colonias aisladas.
En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas.
Incubación
De 24 a 48...
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