Lab bioquimica - azucares

*PREGUNTA CENTRAL:
¿Se puede detectar la presencia de azucares reductores por medio de la reacción de trommer?
Objetivo: Detectar la presencia de azucares reductores en una muestra problema por medio de la reacción de trommer
¿Se puede caracterizar azucares por medio de formación de osazonas? Objetivo: Caracterizar a los azucares por formación de ozonas.
*PRINCIPIOS GENERALES
1ºfundamento: Oxidación de carbohidratos por reacción de Trommer

Los carbohidratos pueden clasificarse ya sea como azúcares reductores o no reductores. Los azucares reductores son los más comunes, están presentes en la molécula grupos aldehídos libres o potencialmente libres como en las formas hemiacetálicas cíclicas, su poder reductor es consecuencia de su capacidad de formar, en un medio alcalino,endioles fuertemente reactivos y fácilmente oxidables. Este grupo aldehído es oxidado fácilmente a ácido carboxílico en PH neutro por agentes oxidantes moderados. Esta propiedad es utiliza para detectar y cuantificar monosacáridos, especialmente glucosa, en fluidos biológicos como la sangre y la orina. El ácido monocarboxílico que se forma se conoce como ácido aldónico (por ejemplo, ácido glucónico dela glucosa).
Una prueba de la presencia de azúcares reductores, es que son susceptibles de oxidarse en presencia de complejos cúpricos alcalinos. El cobre en forma de anión complejo de color azul intenso es reducido del estado cúprico al cuproso y precipita como óxido cuproso rojo.
En los azucares no reductores el grupo carbonilo se encuentra combinado en unión glicosidica, es por eso que estoscarezcan de capacidad reductora, como sucede con la sacarosa





En la reacción de Trommer el azucar es introducido en una solución con hidróxido de sodio y sulfato de cobre. El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con elion cúprico otorgado por el sulfato cúprico reduciéndolo a Cu+
En estos ensayos es posible observar que la fructosa (una cetohexosa) es capaz de dar positivo. Esto ocurre por las condiciones en que se realiza la prueba: en un medio alcalino caliente esta cetohexosa se tautomeriza (pasando por un intermediario enólico) a glucosa (que es capaz de reducir al ion cúprico).
Los disacáridos comola sacarosa (enlace α(1 → 2)O) y la trehalosa (enlace α(1→1)O), no dan positivo puesto que sus OH del C anoméricos están siendo utilizados en el enlace glucosídico.


2º fundamento: Formación de osazonas
Las osazonas se forman cuando los azucares reaccionan con fenilhidrazina. La reacción involucra la formación de fenilhidrazona. La reacción puede ser utilizada para identificar monosacáridos.Involucra 2 reacciones: Primero la glucosa con fenilhidrazina produce glucosafenilhidrazona por eliminación de una molécula de agua del grupo funcional. El siguiente paso involucra la reacción de un mol de glucosafenilhidrazina con dos moles de fenilhidrazina. El carbono alfa es atacado aquí porque es mas reactivo que los otros. Se forma una osazona que contiene dos residuos de fenilhidrazina pormolécula, mientras que una tercera molécula del reactivo se convierte en anilina y amoniaco. Son compuestos altamente coloreados, y pueden ser detectados fácilmente.
La técnica fue desarrollada por Emil Fischer, un químico alemán, para identificar diferentes azúcares. Fischer fue capaz de diferenciar los tipos de azúcar mediante el estudio de los cristales que se formaron a partir de su procedimiento.*PRINCIPIOS
Carbohidratos
Son biomoléculas polihidroxialdehídicas o polihidroxicetónicas, es decir que constan de átomos de carbono unidos a los grupos funcionales carbonilo e hidroxilo. Tienen enlaces químicos difíciles de romper de tipo covalente, pero que almacenan gran cantidad de energía, que es liberada cuando la molécula es oxidada. En la naturaleza son un constituyente...