Lab Bioquimica

2. Análisis de los resultados: explique claramente cada uno de los resultados obtenidos, especificando los mecanismos de reacción de las pruebas y las moléculas o grupos funcionales que fueron detectados.

S AT A | NINHIDRINA | BURET | XANTOPROTEICA | PLOMO |
Glicina | Purpura + | Azul - | Incoloro - | Transparente - |
Cisteína | Purpura + | | Incoloro - | Gris + |
AcidoGlutamico |Purpura + | | Incoloro - | Transparente- |
SoluciónProblema | GrisPurpura + | Negro + | Naranja Intenso+ | Café+ |
Leche | PurpuraRosado + | VioletaRosado + | Naranja+ | Negro+ |
Ovalbumino | + | Morado + | Naranja Intenso + | Verde Claro + |
Agua | - | Azul - | Incoloro - | Transparente - |

4. Investigue sobre los diferentes métodos de separación e identificación de aminoácidos yproteínas.

Aminoácidos:

* Método de separación de aminoácidos: se presenta un método para la separación de un aminoácido aromático de una solución acuosa de aminoácidos mezclados, la solución acuosa se pone en contacto con una resina de intercambio de catión acidico en forma de gel que ha sido convertida en una sal con un metal de alcalino o un metal de tierra alcalino, en la cual la resina deintercambio de catión sobre selectivamente el aminoácido aromático. El aminoácido aromatico asi sorbido puede ser después disorbido de la resina de intercambio de iones, preferiblemente con agua.

* Método para la identificación de aminoácidos: se hace la combinación de la cromatografía en capa fina con la reacción de la ninhidrina con la cual se pueden identificar los aminoácidos por latinción color morado o magenta que se presenta en ellos, excepto con la prolina la cual, da un tono amarillo al reacción rillo al reaccionar con la ninhidrina debido a que no produce amonio al reaccionar con ella, lo que indica que los demás aminoácidos que si presentaron esta reacción.

Proteínas
* Método de separación de proteínas:

* Cromatografía De Exclusión: Los factores que determinanla separación de las moléculas son el tamaño del poro, el tamaño de la partícula y el flujo de elución. Los diferentes tipos de partículas usadas deben ser estables, mecánica y químicamente, tener bajo contenido en grupos iónicos, uniformidad de poro y tamaño. Hay diferentes tamaños de partícula para un gel: a menor tamaño mayor resolución y menor gasto en la columna.
Este técnica se emplea enla separación de proteínas de alimentos, determinación de glucosa y fructosa en zumos de fruta, etc.

* La electroforesis: La electroforesis es una técnica analítica de separación de fundamento cinético basada en el movimiento o migración de las macromoléculas disueltas en un determinado medio (solución tampón de electroforesis), a través de una matriz o soporte reticulado como resultado dela acción de un campo eléctrico. El comportamiento de la molécula viene dado por su movilidad electroforética y ésta por la carga, tamaño y forma de la misma. Cuanto mayor es la relación carga/tamaño más rápido migra un ión en el seno del campo eléctrico. Esta técnica tiene como ventaja su capacidad de separar macromoléculas de interés en la industria biotecnológica y química. Ha sido un método muyútil para la separación de proteínas (enzimas, hormonas) y ácidos nucleicos (DNA y RNA) con gran resolución.

* Métodos para identificación de proteínas:
* Espectrometría de masas: La espectrometría de masas (MS) permite analizar la composición de diferentes elementos químicos e isótopos atómicos, separando los núcleos por su relación masa-carga. Presenta numerosas ventajas frente almétodo de Edman: es más sensible, permite analizar directamente las mezclas proteicas y ofrece un mayor rendimiento por muestra. Por ello, es el método utilizado en las dos técnicas de identificación de proteínas más comunes: la identificación por huella peptídica y el análisis MS/MS.

* Identificación por huella peptídica
* Digestión en gel: Normalmente, la muestra se reduce y alquila....