Lab Fisio CardioII

PRACTICO 4
FUNCIÓN VASCULAR Y TRANSDUCION DE SEÑALES
INTRODUCCION
Los procesos celulares están mediados por
diversos agentes que pueden generar diferentes
tipos de respuestas según el tipo de célula al cual
se una. Para discriminar a la gran variedad de
agentes disponibles, las células diana utilizan
estructuras llamadas Receptores, formados por
proteínas que atraviesan la membrana y conectan
elmedio extracelular con el citoplasma. A estos
receptores se les unen moléculas conocidas como
Agonistas (como las hormonas o los
neurotransmisores, y cuya naturaleza química es
diversa) que afectan la estructura del receptor,
iniciando una cadena de sucesos en el interior de la
célula, mediadas por vías de transducción de
señales, que terminará en una respuesta por parte
de la célula (Figura 1.1,izquierda). Entre las
moléculas que participan en la transducción de
señales se encuentran los segundos mensajeros,
entidades que inician la serie de reacciones
intracelulares que dará como resultado la
+2
respuesta, entre los que se encuentran Ca , AMP
cíclico (AMPc), entre otros. Estos segundos
mensajeros aumentan su concentración en el
intracelular ya sea porque ingresan a la célula (por
+2canales, como el Ca ) o porque una enzima
aumenta su producción (como la Guanilato Ciclasa
que aumenta el GMPc).

En el sistema circulatorio, la respuesta
contráctil de las arterias está mediada por las
células del músculo liso (VSMCs, de Vascular
Smooth Muscle Cells). Este tipo de células se
encuentra principalmente en arterias periféricas,
diferenciándose de los vasos más grandes con
mayorproporción de tejido elástico (como la aorta,
Figura 1.2). La contracción de los vasos está
mediada por Noradrenalina (NA), que actúa sobre
receptores adrenérgicos tipo 1 de las VSCMC. Este
receptor activa una cascada de señales mediada
por un conjunto de Proteínas G (dependientes de
GTP) que activan a la Fosfolipasa C (PLC). Esta
enzima genera Inositol 1,4,5‐trifosfato (IP3) como
segundo mensajero, elcual facilita la movilización
+2
de Ca
desde el retículo endoplasmático,
facilitando la contracción del vaso (Figura 1.1,
derecha).
Por otro lado, la relajación de los vasos
depende de Acetilcolina (Ach), que se une a los
receptores muscarínicos ubicados en las células
endoteliales. Estas células fomentan la producción
de Oxido Nítrico (NO) a través de la Óxido Nítrico
Sintasa (NOS), el cual difundedel endotelio a las
VSMCs, en donde actúa sobre la enzima Guanilato
Ciclasa soluble (GCs) que aumenta la concentración
de GMPc produciendo vasodilatación (Figura 1.1,
derecha).

Figura 1.1. Izquierda: Vías de señalización y sus segundos mensajeros respectivos. Derecha: Esquema simplificado de señalización
mediada por NA y Ach en arterias. FE, Fenilefrina; M, Receptor Muscarínico; GC, GuanilatoCiclasa; AC, Adenilato Ciclasa; PLC,
Fosfolipasa C; PKC, Proteína Quinasa C; NOS, Óxido Nítrico Sintasa.

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En este trabajo práctico estudiaremos la
interacción Agonista‐Receptor utilizando un
sistema basado en la contracción de las arterias. A
través del uso de distintos fármacos que afectan
distintos puntos de las vías de señales (sustancias
que pueden actuar estimulando o inhibiendo unafunción), es posible determinar el efecto que estos
generan sobre el vaso y relacionarlo con el
mecanismo de transducción implicado en la
contractibilidad vascular. Así, la contracción de un
segmento arterial sometido a la acción de
fármacos, pueden ser usado para reconocer la vía
de transducción que un vaso arterial utiliza por
medio de la modificación de segundos mensajeros.
El objetivo de éstelaboratorio es evaluar el
funcionamiento de la vía que utiliza Noradrenalina
para promover la vasoconstricción y la vía que
utiliza Acetilcolina en la relajación en un modelo de
reactividad vascular, mediante Miografías.
PROCEDIMIENTO
(Nota: Este práctico es demostrativo, por lo que
la mayoría de las experiencias serán realizadas por
el profesor a cargo)
Se usarán ratas adultas de la cepa Sprague –...