Lab Meta



METABOLISMO
COLORIMETRÍA Y ESPECTOFOTOMETRÍA

Estudiantes
Arteaga Cobo Juan Sebastián 1441611 PLAN (3647)
Collazos Rosero Oscar David 1439420 PLAN (3647)
Díaz Lombana Natalia 1435080 PLAN (3647)
Jiménez Medina Helkin Gabriel 1437793 PLAN (3647)


Profesor
Carlos Fernando Cardozo Hernández

03 de marzo de 2015 (Fecha de entrega del informe)

RESUMEN

Durante la práctica se efectuóespectros de absorción de la luz visible de donde se determinó la longitud de onda en su absorbancia máxima, encontrándose que para este son cuya absorbancia corresponde a 0.476. Se realizó también una curva de calibración basada en la concentración de destilada y de presente en 5 tubos. Extrapolando, se pudo encontrar la concentración de la Muestra Problema la cual fue de . Se aplicó la ley deBeer-Lambert para confirmar los resultados.


Palabras claves: espectrofotómetro, ley de Beer-Lambert, Absorbancia, longitud de onda, concentración.

INTRODUCCIÓN
Tanto la colorimetría como la espectrofotometría son los métodos de análisis óptico generalmente más usados en las investigaciones biológicas. El espectrofotómetro es un instrumento que permite comparar la radiación absorbida y latransmitida a un foto receptor por una solución que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia;

La colorimetria UV-visible es una técnica analítica que se fundamenta en la absorción de estas radiaciones por parte de las moléculas. Por ello el colorimetro está constituido por un foco de radiación visible o ultravioleta, que emite unaradiación que atraviesa un selector, que permite escoger una radiación de una longitud de onda (λ) concreta. La radiación seleccionada incide sobre la muestra contenida en una cubeta transparente. Una parte de la radiación es absorbida, mientras que el resto es transmitida y se mide en un detector. Cada molécula en función de su configuración electrónica puede absorber unas radiaciones específicas,que se caracterizan por su longitud de onda. Las moléculas en solución pueden absorber radiaciones de la zona ultravioleta (λ=195-325nm) o de la luz visible (λ=325-800nm).
Si cada molécula de una sustancia absorbe una radiación característica, la medida de toda la radiación absorbida nos permite medir la cantidad de moléculas, es decir, la concentración. La absorbancia (A), que se calcula a partirde la medida experimental de la radiación incidente y de la transmitida, y la concentración se hallan relacionadas por la ley de Beer-Lambert: , donde es el camino óptico (espesor de la cubeta) y es la absortividad específica, que es característica para cada sustancia, pero depende de la longitud de onda de la radiación absorbida y de las características de la solución (matriz). Para el análisiscuantitativo se construye normalmente una recta de calibrado con patrones, procurando que la matriz sea igual o muy similar a la de la muestra, y la absorbancia de la muestra se interpola en esta recta de calibrado con el fin de obtener la concentración…. Según Guasch Torres, Josep (2006).
MÉTODOS
Comprendiendo ya que para este laboratorio se trabajo con un colorímetro o espectrofotómetro el cualdetermino la cantidad de energía absorbida por el KMnO4 a diferentes longitudes de onda (400 – 600), se procedió a realizar una curva espectral que relaciona la absorbancia (A) medida por el colorímetro y las longitudes de onda (λ) seleccionando la longitud de onda que presento el pico mas alto (mayor absorbancia). Posteriormente a esto, se realizo una curva de calibración en la cual se aplica laley de Beer - Lambert la cual permitió determinar la concentración de cada una de las soluciones preparadas según su absorbancia, usando la longitud de onda que presento mayor absorbancia anteriormente. Por ultimo se comparó una solución estándar que tuvo una absorbancia cercana a la que generó la solución problema en el colorímetro y, con estos datos se pudo hallar la concentración de la...