Lab1 Frotis Bacteriano



INTRODUCCIÓN


Al momento de trabajar con un frotis bacteriano es necesario conocer que la técnica de asepsia esencial para prevenir que se ingresen organismos que afecten el cultivo al momento de ver la preparación.
Entre los métodos de esterilizaron que se utilizan en microbiología se encuentra el calor seco y húmedo.
La esterilización por calor seco produce la destrucción de losmicroorganismos por oxidación de sus componentes celulares. Éste es un proceso menos eficiente que la esterilización por calor húmedo, porque los microorganismos mueren con mayor rapidez cuando se encuentran en presencia de agua, ya que éste permite que se altere con mayor facilidad la configuración de sus proteínas y proporciona un medio para distribuir el calor uniformemente en toda la cámara internadel equipo de esterilización.
El calor húmedo destruye los microorganismos por coagulación de sus proteínas celulares, el principal método de esterilización que emplea calor húmedo es la
esterilización por vapor a presión.

Existen otros métodos de descontaminación que emplean este tipo de calor los cuales, aunque no permiten la destrucción total de los microorganismos, disminuyen la cargamicrobiana que posee un material.

Un frotis es la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objetivo de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida.








OBJETIVOS


Conocer los principios generales de las técnicas de esterilización y entender la importancia de lascondiciones de asepsia para el control de contaminaciones microbianas en el laboratorio.

Adquirir habilidad en la elaboración correcta de un frotis bacteriano, siguiendo las indicaciones de la guía de laboratorio.

Valorar la importancia de la elaboración de un frotis bacteriano en la realización de tinciones de bacterias.





















MATERIALES Y MÉTODOS



En el Laboratorio que realizamossobre Frotis Bacteriano lo primero que procedimos a realizar fue encender el mechero y luego el asa, se colocó en la flama del mechero hasta que se puso al rojo vivo, y dejamos enfriar el asa para evitar que al tomar las muestras los microorganismos sean destruidos ,luego colocamos la cepa de la bacteria del cultivo suavemente sobre el portaobjetos, le agregamos azul de metileno y losdejamos reposar por 1 min , se lavó con agua destilada, lo secamos y finalmente lo llevamos al microscopio en donde le colocamos aceite de inmersión en el objetivo de 100x.









PROCEDIMIENTO.

Parte 1: Realización del frotis.
La muestra se tomó de un cultivo en medio líquido, no fue necesario realizar los dos primeros pasos del procedimiento ya que bastó con colocar y extender una gota de lasuspensión bacteriana, que se tomó con el asa de siembra, directamente sobre el portaobjetos.
Se esperó hasta que el líquido se evaporara, pero agilizando este proceso, acercando el portaobjetos a la llama del mechero. Se tuvo mucha precaución de no calentar demasiado las muestras para que las células no se deformaran ni se rompieran.
Parte 2: Fijación de las Bacterias al Portaobjetos.
Por calor:Se pasó tres veces el portaobjetos por la llama durante unos segundos. Y se dejó enfriar en porta entre los pases.
Una vez que se realizó el frotis y se fijaron las bacterias, las preparaciones pudieron ser observadas en el microscopio. Se continuó con el proceso de tinción normal.
Parte 3: Tinción del frotis bacteriano
Cubrimos el frotis con abundante colorante y lo dejamos actuar en el tiempoque indicaba el protocolo de cada tinción concreta. Que oscilaba entre 1 y 5 minutos. En ocasiones el colorante tiñe solo en caliente, por lo que el tiempo que duro su actuación debimos sostener el portaobjetos con pinzas sobre la llama del mechero para que hume el colorante, pero tuvimos mucho cuidado para que no llegara a hervir ya que se produciría la destrucción de las células.
Lavamos la...