Laboratorio 2 Microbiología




Informe de Laboratorio
Práctico N°2 “Preparación y Siembra en Medios de Cultivo”
Microbiología.
Prof. Karla Martínez Ortiz








Integrantes
Martina Molina Núñez
Valentina Sepúlveda Orrego
Carrera
IV Semestre
Técnico en Análisis Químico
Fecha
Jueves 3 de Septiembre, 2015

1. Fundamento Teórico
Una de las técnicas que se realiza en el laboratorio de Microbiología, es la preparación desustancias alimenticias artificiales llamadas medios de cultivo, éstas se utilizan para observar el crecimiento o cultivo de un microorganismo y así poder identificarlo de mejor manera.
Para que las bacterias crezcan en un medio de cultivo deben existir ciertas condiciones como temperatura, grado de humedad y presión de oxígeno, así como un grado especifico de acidez o alcalinidad.
Existen medios detipo naturales, los que están constituidos por sustancias complejas de origen animal o vegetal, que son usualmente complementadas por la adición de minerales y otras sustancias.

Los medios de cultivo están constituidos mediante diversas preparaciones, la base de muchos medios de cultivo es una infusión de extractos de carne y Peptona a la que se añadirán otros ingredientes.
El agar es unelemento muy utilizado. Se licúa completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mínimas excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en él.
Los medios de cultivo pueden clasificarse según diferentes criterios, pero los más importantes son aquellos que se basan en, su consistencia, utilización,composición y origen, y pueden disponerse idealmente en placas de Petri debido a su gran superficie, que permite un mejor aislamiento del cultivo, así como también tener presente la preparación en tubos de ensayo para la siembra de microorganismos.
Lo expuesto antecede al proceso de siembra, el que consiste en promover intencionalmente el desarrollo de un microorganismo, dentro de un medio decultivo en condiciones de laboratorio controladas. Se realiza transfiriendo una muestra microbiológica de un ambiente determinado, todo con fines cuantitativos o cualitativos.
En siembra de placa en medios sólidos se encuentra la técnica por estrías, por inclusión y por extensión.
Todo asilamiento concluye con la obtención de colonias aisladas, estas pueden ser de forma y tamaño variable dependiendodel organismo, condiciones del cultivo, suministro de nutrientes y otros parámetros fisiológicos.


2. Metodología

2.1. Materiales y Equipos
Detergente enzimático.
Toalla de papel
Algodón hidrófilo
Alcohol yodado.
Pisetas
Jabón desinfectante
Agua destilada
Frasco esterilizable tapa azul
Probeta de 250 ml
Vidrio reloj
Balanza analítica
Guantes desechables
Mascarilla desechable
Mechero BunsenFósforos
Vaso precipitado
Alcohol 95°
Cuchara
Propipeta
Pipetas
Gradilla
Tubos de ensayo
Placas de Petri
Algodón hidrófobo
Asas de siembra
Asas Digralski
Agitador magnético
Barra magnética
Marcador permanente
Medios de cultivo a preparar.
Cinta indicadora de esterilización de calor húmedo
Cinta mastik
Calculadora
Autoclave


Para una mejor comprensión y desarrollo del práctico, los pasos a seguir sedividirán en tres procedimientos, para para los cuales se cuenta con el mismo listado de materiales, salvo que en primera instancia se desglosa la preparación del medio de cultivo, la segunda técnica se enfoca en la dosificación del medio de cultivo previamente esterilizado, para posteriormente realizar la siembra de microorganismos.

2.2. Procedimiento para la preparación del Medio de cultivo
Paracomenzar a realizar alguna actividad en el laboratorio de Microbiología, se debe contar con una superficie de trabajo libre de microorganismos, limpiada con toalla de papel junto a una solución de detergente enzimático preparado con anterioridad en una piseta, y desinfectada con la ayuda algodón hidrófilo y alcohol yodado. Procurar ejecutar siempre un lavado de manos con jabón desinfectante,...