Laboratorio 5 microbiologia

INFORME DE LABORATORIO N. 5


MICROBIOLOGIA AMBIENTAL


ALUMNOS:
LUIS ARTURO GOMEZ
ANDRES MAURICIO ENRIQUEZ
JUAN FELIPE MONTOYA
KEVIN BENAVIDES
JUAN CAMILO CAICEDO



PRESENTADO A:
ALVARO DIEGO ALBORNOZ



FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL
UNIVERSIDAD MARIANA
2013

INTRODUCCIÓN
Las bacterias en condiciones normales se desarrollan con formas definidas, las cuales sonproporcionadas por la rigidez de la pared celular, estas son esféricas, ovaladas, en forma de bastón o de espirales. Por esto es importante realizar una correcta observación de estas características. La morfología de los microorganismos puede ser u observada a partir de preparados frescos, y teñidos, ya que por su misma estructura son difíciles de visualizar en su estado natural.
Mediante eldesarrollo de esta práctica se busca conocer las técnicas de coloración, las cuales sirven para poder identificar bacterias de acuerdo a algunas de sus propiedades, esto es de gran utilidad ya que se conocerán los procedimientos para determinar la funcionalidad de estas, o saber cómo controlarlas.
OBJETIVOS
Reconocer la morfología celular bacteriana, así como, las diferentes agrupaciones y otrosaspectos morfológicos de las bacterias.
Realizar diferentes técnicas de coloración para observar las bacterias en el microscopio.
Diferenciar las bacterias teniendo en cuenta la coloración de gram.
METEDOLOGIA
Después de recibir los materiales, y las colonias de E. coli y Staphylococcus aureus, los cuales se entregaron un cultivo por cada mesa, de cada una de estas bacterias, el profesorprocedió a dar unas explicaciones acerca de los procedimientos y de cómo hacer una correcta preparación del portaobjetos, y una adecuada utilización de los reactivos, para que la muestra pueda ser observada en el microscopio. Luego se continúo a realizar los procedimientos. Primero se esterilizo, en el mechero, el asa, y con ella se tomo una muestra de Staphylococcus y se coloco en el portaobjetos,luego se fijo cerca al mechero, después se agrego azul de metileno a la muestra, luego de un minuto se lavo con agua destilada, dejando secar el porta objetos, cerca al mechero, inmediatamente se cubrió con el cubreobjetos y se observo en el microscopio a cuatro y cien ‘x’ de aumento.
Luego se realizo el procedimiento para la tinción de gram, se esterilizo el asa, y con ella se tomo varias muestrasde el cultivo de E. coli, Staphylococcus aureus, y de una caja de Petri, en la cual estaban cultivos de bacterias que se realizo en laboratorios anteriores, se los coloco en un portaobjetos, luego se fijo cerca al mechero, después se agrego violeta de genciana a la muestra, al cabo de un minuto se lavo con agua destilada, luego se agrego lugol a la muestra, después de un minuto se lavo conagua destilada, se agrego alcohol cetona a la muestra, luego de treinta segundos se lavo con agua destilada, luego se agrego fucsina a la muestra, después de un minuto se lavo con agua destilada dejándose secar el porta objetos cerca al mechero, este se cubrió con el cubreobjetos y se observo en el microscopio a cuatro y cien ‘x’ de aumento.
Después de observar en los dos tipos de tinción serealizaron las anotaciones respectivas, se lavo y devolvió el material a la ayudante de laboratorio.

RESULTADOS

1) Coloración:

De gran:

Escherichia coli: gram negativa, coloración rosada, forma de bastones.
Staphylococcus aureus: gram positiva, coloración violeta, forma de cocos.
Muestra 1 taza de baño: gram positiva, coloración violeta, forma de cocos.
Muestra 2 taza de baño: gramnegativa, coloración rosada, forma de cocos.

Azul de metileno:
Staphylococcus aureus: teñida de azul, forma de cocos.

2) Fundamentos de diferenciación de Gram positivo y Gram negativo.

Los fundamentos de la técnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de las bacterias Gram positivas y Gram negativas.

La pared celular de las bacterias Gram positivas posee una gruesa...