Laboratorio biologia: electroforesis
-------------------------------------------------
Jorge Yesid Becerra Albarracín, Laura Karina Perico Rodríguez, Geraldine Cecilia Castro Tarazona, Miguel Ángel Gómez Tristancho.
-------------------------------------------------
Universidad de Boyacá, Facultad de Ciencias de la Salud, Medicina, Grupo 2,Subgrupo 21, Tunja Boyacá, año 2011, República de Colombia.
1. Resumen:
Teniendo en cuenta desde un principio el conocimiento adquirido en los pasados laboratorios de biología molecular, en el uso de la micropipeta y el uso adecuado de los equipos que se encuentran en el aula de práctica, se realiza el extenso y completo laboratorio de obtención de ADN bacteriano y Sanguíneo, utilizando distintastécnicas siendo una de ellas y la más importante, en este caso, la de la Electroforesis. Utilizando distintos equipos como el kit ‘Wizard’ de ‘Promega®’, se lleva a cabo la práctica, siguiendo estrictamente el protocolo descrito en él mismo equipo de trabajo.
Para la extracción y el análisis del ADN tanto Eucariota como Procariota es necesario aislar el ADN de las dos células, cuya metodologíase basa en una serie de etapas básicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. A continuación debe romperse también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. Luego de varios procedimientos sepuede observar claramente la precipitación concentrada del ADN.
Después de tal proceso, la electroforesis se ofrece para la separación de moléculas según la movilidad de estas en un campo eléctrico La variante de uso más común para el análisis de mezclas de proteínas o de ácidos nucleicos utiliza como soporte un gel, habitualmente de agarosa, con la finalidad de que los Procariota ya quedisponen de una carga eléctrica negativa, que se dirijan al polo positivo. Al poner la mezcla de moléculas y aplicar un campo eléctrico, éstas se moverán y deberán ir pasando por la malla del gel (una red tridimensional de fibras cruzadas), por lo que las pequeñas se moverán mejor, más rápidamente. Así, las más pequeñas avanzarán más y las más grandes quedarán cerca del lugar de partida. A continuaciónse detalla el proceso de este enriquecedor laboratorio.
Palabras Clave: Laboratorio, biología molecular, micropipeta, ADN, bacteriano, Sanguíneo, Electroforesis, Eucariota, Procariota, ácidos Nucleicos, carga eléctrica, polo positivo, gel.
1. Abstract:
Taking into account from the outset the knowledge gained in the past molecular biology laboratories in the use of the micropipette and theproper use of equipment found in the classroom practice is made by the extensive and comprehensive collection of DNA laboratory Bacterial and Blood, using different techniques being one of them and more importantly, in this case, Electrophoresis. Using different kit clubs like 'Wizard' of 'Promega ®' is carried out the practice, strictly following the protocol described in his own team.
For theextraction and analysis of both eukaryotic and prokaryotic DNA is necessary to isolate the DNA of two cells, whose methodology is based on a series of basic steps. First they have to break the cell wall and plasma membrane to access the cell nucleus. Then you must also break the nuclear membrane to free the DNA. Finally, we must protect DNA from enzymes that can degrade and isolate must be madeto precipitate in alcohol. After several procedures can clearly observe the concentrated precipitation of DNA.
After this process, electrophoresis provides for the separation of molecules according to the mobility of these in an electric field variant most commonly used for analyzing mixtures of proteins or nucleic acids used to support a gel, usually agarose in order that the prokaryotes and...
Regístrate para leer el documento completo.