Laboratorio De Cromatografia

LABORATORIO #7
CROMATOGRAFIA

SIXTO BERMUDES ROA

OLGA MARZOLA
KEILA VELLOJIN

LABORATORIO DE QUIMICA ORGANICA
UNIVERSIDAD PONTIFICIA BOLIVARIANA
INGENIERIA AGROINDUSTRIAL
SEMESTRE 2
MONTERIA/CORDOBA
2012

INTRODUCCION

La cromatografía es un método usado principalmente para la separación de los componentes de una muestra, en el cual los componentes son distribuidos entre dosfases, una de las cuales es estacionaria (soporte sólido), mientras que la otra es móvil (sustancia que fluye por la fase estacionaria). Esta técnica de separación de solutos de una mezcla, que se basa en la diferente velocidad con que se mueve cada uno de los solutos a través de un medio poroso, arrastrados por un disolvente en movimiento. A este disolvente se le llama fase móvil y el medio porosopuede ser la fase estacionaria, o bien servir de soporte a esta fase. Se habla de cromatografía en columna cuando la fase estacionaria o su soporte están contenidos en una columna.Uno de los diversos tipos de cromatografías que existen (cromatografía en columna, en papel, en fase gaseosa, etc) es la Cromatografía de Capa Fina (TLC)
La separación cromatografía constituye un proceso dinámico quepermite un intercambio continuo por desplazamiento de una fase con respecto a la otra. El diferente reparto de solutos entre las fases móvil y estacionaria es la causa de la separación de los solutos. El soluto que tiene mayor afinidad por la fase estacionaria se moverá con mayor lentitud.

OBJETIVOS

* Conocer y aplicar la técnica de cromatografía en capa fina, sus características y losfactores que en ella intervienen.

* Identificar los principales componentes lipídicos de la muestra, conforme a los valores de Rf de los estándares, y determinar así los Rf de las muestras.

* Deducir a través de Rf la relación que existe entre la polaridad de las sustancias que se analizan y la de los eluyentes utilizados

PARTE EXPERIMENTAL

MATERIALES

* Embudo de decantación* Probeta graduada
* Soporte universal
* Aros y pinzas para soporte
* Tubos de ensayos grandes
* Beaker de 50ml
* Agitador
* Erlenmeyer
* Balanza

REACTIVOS

* Violeta de cristal
* Cloruro de metileno
* Acido benzoico
* P- diclorobenceno
* Éter etílico
* Hidróxido de sodio al 10%
* Cloruro de calcio

PROCEDIMIENTO

PARTE 1LABORATORIO # 6
LABORATORIO # 6

ESPINACA
ESPINACA

4ml hexano
4ml hexano


2ml ETOH
2ml ETOH

Ex. pigmentos
Ex. pigmentos
Fase ETOH H2O
Fase ETOH H2O
Fase orgánica
Fase orgánica

Extracto orgánico
Extracto orgánico
Marco
Marco


H2O
H2O

Sulfato de sodio
Sulfato de sodio
2ml H2O
2ml H2O
2 veces
2 veces
Fase orgánica
Fase orgánica
Fase h2o
Fase h2o



PARTE2

CROMOTOPLACA


PARTE 3
ELUENTES

* Hexano/acetona 7:3
* Hexano/ETOH 8:2
* Cloroformo/acetona 7:3
* Hexano/cloroformo 5:5
* Cloroformo/ acetona 5:5

PIGMENTOS | COLOR |
carotenos | Naranja |
Clorofila a | Verde azulado |
xantofilas | Amarillo |
Clorofila b | Verde |


RESULTADOS Y DISCUSIÓN

1. Dibujar lacromatoplaca con los resultados obtenidos

1 cm
1 cm
c
c
1 cm
1 cm
6 cm
6 cm

= color amarillo a 5 cm es decir xantifilas
= color amarillo a 5 cm es decir xantifilas


=color naranja a 5,8 cm es decir carotenos
=color naranja a 5,8 cm es decir carotenos

= color verde a 6 cm es decir clorofila b
= color verde a 6 cm es decir clorofila b2. Calcular los Rf de cada uno de los puntos obtenidos

Rf=56=0,83 xantofilas

Rf= 5,86=0,96 caroteno
Rf= 66=1 clorofila b
(Grupo #5 eluentes)
Cloroformo/ acetona / 5:5
Colores: naranja, amarillo, verde

grupos | Rf | color | Rf | color | Rf | color | Rf | color |
1 | 0,97 | amarillo | 0,34 | verde | 0,44 | v.azulado | | |
2 | 1 | naranjado |...